上海沪震实业有限公司自成立以来我们一直从事ScienCell和美国ATCC细胞以及菌株等产品的销售工作，对产品知识更多了解，对产品性能把握更准确。
我们的优势是：
1.供货及时。我们订货周期短，运输时间短，在最短时间内为您提供所需产品。
2.价格优惠：我公司是ScienCell和美国ATCC的ZG代理商，没有中间环节。在国内我们保证价格ZD。
3.服务保障：我们拥有专用的技术指导团队，对每售出的一件产品，提供全面的售前、售中和售后服务。
4. 产品种类齐全：25个系统共150多种细胞以及各类菌株，满足不同客户的要求。细胞经过严格的质控，纯度可达98％。常用产品备有现货。其产品类型如下：消化系统细胞株，呼吸系统细胞株，泌尿系统细胞株 生殖系统细胞株 血液循环系统 内皮细胞细胞株 神经系统及其他细胞株，动物细胞株和菌株
5.对于部分难培养的细胞我公司可代复苏细胞，并提供技术支持。
6.经验丰富：我公司是国内专业化的细胞销售公司，具有十余年细胞产品销售经验，有专业的销售团队和技术人员。公司的每一位员工都将竭诚为您服务。
一)准备和安装过滤器 清洗好过滤器，干燥，放入一张孔径0.22μm的微孔滤膜，用布包装好，15磅20 min进行高压灭菌处理。 在超净台内打开过滤器架好，胶管一端接入滤泵再插入待CJ的液体中，出口端胶管深入到已消毒好的瓶子中。用泵过滤，过滤后要检查滤膜是否完好无损。
(二)合成培养基的配制 1、根据细胞目录中的说明，按下表选择合适品Pai及货号的培养基干粉，用适量超纯水充分溶解。
2、 按要求添加碳酸氢钠、谷氨酸钠、HEPES等，充分搅拌使之溶解。
3、 调 pH至7.2左右。
4、 加水至ZZ体积。
5、 在超净台中对溶液进行滤过CJ，分装入250 mL或500 mL玻璃瓶中，用翻帽塞塞紧瓶口。
6、 瓶口封好，4℃冰箱贮存。
（三）小牛血清的处理 市场上出售的小牛血清一般做了灭菌处理，但在使用前还应做热灭活处理，即通过加热的方法破坏补体(近来也有观点认为热灭活处理是不必要的)。胎牛血清不必灭活。
1、 将血清加热至56℃并保持30 min，其间要不时轻轻晃动，使受热均匀，防止沉淀析出。
2、 处理后的血清贮存于4℃。
3、 小牛血清在使用前进行筛选以掌握血清的质量。
(四)生长培养基的配制 除无血清培养之外，各种合成培养基在使用前需加入一定量的小牛血清或胎牛血清和KJ素。
1. 培养基分装成小瓶(100～200 mL)以便使用，翻帽塞塞紧瓶口。
2. 按如下比例配制： 基本培养基占80％~90％，小牛血清或胎牛血清占10％~20％。 按1％体积分数加入双抗贮存液(青霉素+链霉素)，使青霉素和链霉素的终浓度分别为100 U／mL和100 μ／mL，。
(五)冻存细胞的复苏1. 应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37。5度，取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。
2. 在无菌台内将完全培养基加入50ml的小培养瓶内，约5ml左右，然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞，置培养并内轻轻摇晃，使细胞均匀后置培养箱内培养。
(六)传代: 贴壁细胞:对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基，吸的越干净越好，以免中和后加入的消化液，使强度减弱（或PBS洗1－3次）。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml，按此比例进行消化，(根据经验)，晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟，镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后，轻轻振动瓶底使细胞全部脱落，加入2-3ml完全培养基后，轻轻吹打，使细胞基本成单个悬浮，然后分置其它无菌培养瓶内，加入完全培养基后继续培养或实验。
1. 悬浮细胞:
一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内，加入完全培养基继续培养，如要高浓度可先离心1000rpm，5min后加入完全培养基，轻轻吹匀后，分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。
(七)冻存 将贴壁细胞消化后离心收集，悬浮细胞直接离心收集，以完全培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml。加入10%的DMSO。以每管1～2ml分装至冻存管中。用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜。次日保存到液氮中。
(八)注意事项1. 玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上;
2. 无菌工作台先清洗后用75%酒精擦拭干净，紫外线照射40分钟以上;各种培养板照射3小时以上;
3. 培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内，用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取完全培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天，肉眼见无浑浊或沉淀等异物。分装后置4度保存;
4. 消化液(pH7.8)或其它加入液，应用高压蒸汽灭菌或一次性无菌滤器过滤CJ，分装成支置-20度保存;
5. 培养箱应先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外线的应照射1小时以上，如有高温灭菌的应按程序来菌)。至少每月一次。
6. 进入操作时应注意先清洗双手及手腕，然后用75%酒精擦拭，操作时注意无菌台内空间层次。手及物品不要在暴露的瓶口上方来往，如果数量较多，培养瓶应放在与酒精灯平行地方便于操作，瓶与瓶之间应相隔一定的距离，开瓶(盖)时应先用75%酒精反复擦拭或用灯烧，打开后应用灯先烧口，然后烧盖。用完后同样操作。整个操作过程尽量在无菌台靠里面一点
