固相免疫测定技术是一种非均相免疫测定技术,需以洗涤操作将特异结合于固相的抗原或抗体与反应温育过程中吸附的非特异成份分离开来,以保证NADPH氧化酶放免ELISA试剂盒测定的特异性。因此,洗板对于NADPH氧化酶放免ELISA试剂盒测定来说,也是极其关键的一步。以HRP作为标记酶的ELISA试剂盒中使用的洗板液一般为含0.05% Tween20的中性PBS,Tween20为一种非离子去垢剂,既含亲水基团,也含疏水基团,其在洗涤中的作用机理是,借助其疏水基团与经疏水性相互作用被动吸附于聚苯乙烯固相上蛋白的疏水基团形成疏水键,从而削弱蛋白与固相的吸附,同时在其亲水基团与液相中水分子的结合作用下,促使蛋白质脱离固相而进入液相,这样就可达到去掉非特异吸附物的目的,但由于抗体或抗原的包被通常也是通过在碱性条件下与固相的疏水性相互作用而被动吸附于固相,因此要注意非离子去垢剂的使用浓度,洗板液中Tween20浓度高于0.2%,可使包被于固相上的抗原或抗体解吸附而影响试验的测定下限。
在临床实验室中,NADPH氧化酶放免ELISA试剂盒测定的洗板一般有两种方式,即手工和洗板机洗板。手工洗板即是在每次反应温育后,将反应液吸出或甩干,然后在板孔中加满洗液,放置2~3分钟后,将洗液吸出或甩干,再在吸水纸上拍干。重复上述洗涤步骤3~4次,在吸水纸上拍干,即可进行下一步测定操作。洗板机洗板则是将上述手工操作改由洗板机进行,使用洗板机洗板的一个特点是,每次洗板后不能拍干,故有较多的液体残留,液体残留量小的洗板机洗板至彻底所需的次数要少于残留量大的洗板机。NADPH氧化酶放免ELISA试剂盒在特定临床实验室所使用的洗板机,到底洗多少次能达到要求,可进行下面这个简单的实验:选择4×8 HBsAgELISA包被板条,每2×8孔分别加入相同一份弱阳性和一份阴性样本,按试剂盒说明加入酶结合物并完成温育后,洗板孔时按排4孔洗1次、第二批4孔洗2次、第3排4孔洗3次——直至第8排4孔洗8次,加底物显色测定,如洗3次后,显色不再改变,即洗3次的板孔比色测定与4次、5次洗板的板孔的吸光度等相同,阳性/阴性值保持不变,则可以认定该实验室所用洗板机3次洗板即可达到要求。
在现在的ELISA商品试剂盒中,血清样本的加入几乎是WY的要使用微量加样器加入样本的步骤。使用微量加样器加样必须注意的关键点是:NADPH氧化酶放免ELISA试剂盒加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出现重复滴加或加在两孔之间的现象,这样就会在孔内的非包被区出现非特异吸附,从而引起非特异显色。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。
xy-E10401 人Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 People Ⅲ procollagen peptide (P Ⅲ NP) ELISA kit
xy-E10402 人Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒 People Ⅱ collagen (Col Ⅱ) ELISA kit
xy-E10403 人Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒 Human collagen type Ⅰ (Col Ⅰ) ELISA kit
xy-E10404 人Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 People Ⅰ procollagen carboxy-terminal peptide (P Ⅰ CP) ELISA kit
xy-E10405 人Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)ELISA试剂盒 Human collagen type Ⅳ (Col Ⅳ) ELISA kit
xy-E10406 人Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA试剂盒 People Ⅲ collagen (Col Ⅲ) ELISA kit
xy-E10407 人层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒 Human laminin / laminin (LN) ELISA kit
xy-E10408 人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒 Human fibronectin (FN) ELISA kit
xy-E10409 人NOGO-A抗体(Nogo-A Ab)ELISA试剂盒 Human NOGO-A antibody (Nogo-A Ab) ELISA Kit
xy-E10410 人抗组织转谷氨酰胺酶抗体IgA(tTG-IgA)ELISA试剂盒 Human anti- tissue transglutaminase antibody IgA (tTG-IgA) ELISA kit
xy-E10411 人抗存活素抗体/生存蛋白(Surv)ELISA试剂盒 Human anti- survivin antibody / survival protein (Surv) ELISA kit
xy-E10412 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM-CSF Ab)ELISA试剂盒 Human granulocyte- macrophage colony stimulating factor antibody cell (GM-CSF Ab) ELISA kit
xy-E10413 人抗肌联蛋白抗体(TTN)ELISA试剂盒 Human anti- titin antibody (TTN) ELISA Kit
xy-E10414 人抗突触前膜抗体(PsmAb)ELISA试剂盒 Human anti- presynaptic membrane antibody (PsmAb) ELISA kit
xy-E10415 人血管紧张素Ⅱ受体2抗体(AT2R-Ab)ELISA试剂盒 Angiotensin Ⅱ receptor 2 antibody (AT2R-Ab) ELISA kit
xy-E10416 人血管紧张素Ⅱ受体1抗体(ATⅡR1)ELISA试剂盒 Angiotensin Ⅱ receptor antibody (AT Ⅱ R1) ELISA kit
xy-E10417 人血管紧张素Ⅰ受体抗体(ANG-ⅠR)ELISA试剂盒 Angiotensin Ⅰ receptor antibody (ANG-Ⅰ R) ELISA kit
xy-E10418 人卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA试剂盒 People ovalbumin -specific IgG (OVA sIgG) ELISA kit
xy-E10419 人抗钙调素特异抗体(CAM-ab)ELISA试剂盒 Human anti- calmodulin -specific antibody (CAM-ab) ELISA kit
xy-E10420 人甲状腺非肽激素抗体(THAA)ELISA试剂盒 Thyroid hormone non-peptide antibodies (THAA) ELISA kit
xy-E10421 人抗类固醇生成细胞抗体(SCA)ELISA试剂盒 Human anti- steroid producing cells antibody (SCA) ELISA kit