植物棉花烟草番茄甜菜马铃薯快速基因沉默(VIGS)
选择凯益的理由
自有实验室和团队
从基因克隆到植物转化的全程服务
国内Z多样的植物转基因平台
独有的基因快速筛选技术
凯益生物科技有限公司由中科院上海生命科学研究院投资控股,专注于植物基因工程领域的技术研发,能够与科研工作者进行专业便捷的项目合作,完成基因克隆、载体构建、植物转基因、检测分析等各类实验工作。
凯益生物的部分合作方包括:南京农大、江苏农科院、浙江大学、中科院上海生科院、上海农科院、安徽农大、中科院动物所、沈阳农大、云南农科院、青海农林院、海南橡胶所、ZG农科院、南阳师范、山东大学、山东农大、广西大学、湖南农大、北京大学、复旦大学、上海交大、四川农大、江西农科院、内江师范、洛阳师范、北京农学院、新疆农垦、华南植物园等。涉及的植物品种涵盖烟草、拟南芥、棉花、水稻、小麦、大豆、油菜、番茄、黄瓜、马铃薯、苜蓿、康乃馨、枸杞等近二十种。
凯益生物同时拥有基于VIGS技术的快速基因筛选技术,可以不通过费时耗力的植物稳定转化过程,对批量植物基因进行高通量的初步功能鉴定。
■技术简介
病毒介导的基因沉默技术(VIGS)是一种适用于快速高通量研究和鉴定植物基因功能的新技术,其原理是利用植物天然防御病毒的保卫机制。当在植物病毒载体上装入植物内源的目的基因,并接种植物后,病毒在植物体内产生系统性侵染,蔓延到全株,同时表达出该目的基因的双链RNA(dsRNA)。这种dsRNA会触发植物体内RNAi机制,定向降解植物内源的该目的基因的转录产生mRNA,导致该目的基因功能的下调或YZ,从而通过与植物表型变化的结合分析,了解该目的基因的功能。
另一种应用是将病毒做为目的基因表达载体,装入目的基因全长序列,侵染植物。由于病毒的扩散和复制很快,因此可以在整株植物内快速积累目的基因表达产物。如果目的基因是植物内源基因,此方法相对于稳定转化的过表达还具有独特的优势。因为稳定转化插入的目的基因会引发其内源基因的沉默,反而得不到过表达的植株,但在病毒载体上携带的目的基因却可以随同病毒基因组的复制和转录而大量表达。 以植物病毒做为基因载体,可以同时从正向遗传机制(过表达)和反向遗传机制(基因沉默)两方面研究目的基因功能。
我们已经在棉花、烟草、拟南芥、番茄、马铃薯、小麦、甜菜等植物品种上成功建立了这种快速转基因技术体系。
棉花、烟草、番茄(从左至右)分别VIGS沉默PDS/SU基因后叶片系统性白化/黄化
此外,在植物病毒载体上装入植物寄主(如昆虫、真菌、细菌等)的关键基因序列,接种植物后会产生该序列的小RNA(siRNA)。寄主入侵植物后摄入的这些siRNA同样在寄主体内引发RNAi,下调或YZ寄主的关键基因,从而产生减少寄主危害,达到提高植物对寄主抗性的研究目的。
优点:
1.VIGS技术在当代植株上直接产生RNAi效果,大幅节约时间和成本;
2.避免传统转基因体系的弊端,尤其适合转化体系不成熟的植物;
3.VIGS技术可以同时实现多个基因的沉默; 4.VIGS技术可以对缺失致死的基因进行表达下调研究;
5.VIGS技术可以同时沉默基因家族中的单个或多个基因,解决基因家族冗余性问题。
局限:
1.病毒载体适用的植物品种有所限制;
2.病毒载体一般不能完全YZ目标基因表达,可能影响表型变化的判断;
3.病毒载体在不同植株内和不同条件下引发的基因沉默效果可能存在差异。
■技术路线
■服务选项
■服务说明
1.全年均可开展项目实验;
2.采用的病毒载体为TRV、PVX、BSMV、BMV,以目的基因沉默为主,也可用于基因的过表达;
3.所说的2个月周期是指载体构建后至接种形成植株系统性感染并表达插入的目的序列的时间,由于VIGS形成的基因沉默或过表达效果可能持续到开花、结实等整个生活史,因此根据表型观察要求,实验周期可能延长;
4.每1个月向客户提供项目报告,包括:
(1)进度描述
(2)载体构建报告
(3)棉花接种图片
(4)棉花对照表型图片,VIGS棉花表型图
(5)VIGS棉花目标基因定量PCR分析报告
5.获得的VIGS植株可提供给客户自行进行表型观察和基因分析;
6.签订合同并收取50%预付款后3日内项目启动,交付标的物后5日内支付50%尾款,因客观因素或技术风险导致项目无法完成的,仅收取合同金额的30%作为成本补偿,多余的预付款退还客户;
7.客户可以对项目服务选项、交付标的提出个性化要求,双方协商确定技术方案和费用。
公司网址:http://www.kaiyibiotech.com
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