由于ChIP-Seq的数据是DNA测序的结果,为研究者提供了进一步深度挖掘生物信息的资源,研究者可以在以下几方面展开研究:
(1)判断DNA链的某一特定位置会出现何种组蛋白修饰;
(2)检测RNA polymerase II及其它反式因子在基因组上结合位点的精确定位;
(3)研究组蛋白共价修饰与基因表达的关系;
(4)CTCF转录因子研究。
研究内容
1.测序
对客户提供的ChIP样品(如果有阴阳参启动子区域或DNA序列的)进行定量检测,检测合格后进行测序文库构建、DNA成簇(Cluster generation)扩增、高通量测序。
2.基本数据分析
数据产出统计:对测序结果进行图像识别(Base calling),去除污染及接头序列;统计结果包括:测定的序列(Reads)长度、Reads数量、数据产量。
3. 高级数据分析
标准高级数据分析内容包括:
(1)ChIP-Seq序列与参考序列比对;
(2)Peak calling:统计样品Peak信息(峰检测及计数、平均峰长度、峰长中位数);
(3)统计样品Uniquely mapped reads在基因上、基因间区的分布情况及覆盖深度;
(4)给出每个样品Peak关联基因列表及GO功能注释;
(5)在多个样品间,对与Peak关联基因做差异分析。
技术特点
分辨率高:精确至单个碱基。
检测范围广:覆盖全基因组,可以研究在基因组上稀有存在的目的位点(Sharp binding)。
信噪比高:没有动态量程局限,背景低。
需要的样品量低:每个样品仅需要10-50ng的DNA。
灵敏度高:每个ChIP样本可获取数百万个有效序列标签。