英文名称:Lipase(pocine pancreas)
其他名称:脂酶;脂肪水解酶;脂肪分解酵素
CAS号:9001-62-1
分子量:一般在20000到60000之间
活力:≥30000u/g
干燥失重:≤8.0%
性状:白色或淡黄色粉末。属脂肪加水分解酶类,和蛋白酶、淀粉酶并称三大水解酶类。Z适温度35~37℃。酶反应:甘油三酯+H2O=甘油二酯+脂肪酸阴离子。对一级酯基团Z易水解。甘油单酯是差的底物。有两个差不多相同的同工酶脂肪酶: A与B。等电点(pI)A为4.9、 B为5.0。吸光系数(E1%280)13.3。激活剂为钙(CA2+)。
溶解方法1:用90ML无Ca、Mg离子PBS溶解该酶,再加该PBS至100ML(该酶溶解较难,必要时在4度过夜以便溶解)。用时调PH7.2左右,用5.6%NaCO3调
溶解方法2:维持反应锅内溶液80℃的温度至少半小时,然后由夹层通入自来水降低锅内溶液温度至 50 ℃,按 1∶30的酶/底物比加入需要量的脂肪酶,在搅拌器连续搅拌下开始酶解反应,期间调整通入反应锅夹层的蒸汽量使温度维持在50℃。酶解反应过程中,为保证该酶的生物活性使反应液的pH维持在8.0,这就需要不断在反应液中加入NaOH稀溶液。自加入脂肪酶起6h后酶解反应结束
溶解方法3:准确称取NaCl 8.00g,KCl 0.40g、Na2HPO4•7H2O 0.09g、KH2PO4 0.06g、酚红0.01g、NaHCO3 0.35g,溶解于约800mL五蒸水中,充分溶解后定容至1000mL,分装,灭菌备用,制成D-hanks液。准确称取脂肪酶0.125g,溶解于100mL D-hanks液中 ,于4℃过夜,过滤分装,-20℃保存备用
用途:科研、实验。定量分析血清中甘油三酯。前列腺素脂的分析。脂肪分析。用于水解酯键1,3位,分解脂肪成甘油和脂肪酸
保存:2~8℃
温馨提示:不可用于临床ZL。