人细胞因子抗体芯片2000——玻片芯片

人细胞因子抗体芯片2000 检测174个指标
 

人细胞因子抗体芯片6（60）抗体列表AbL-14
RayBio^® Human Cytokine Antibody Array 6 (60) Antibody List

一、实验原理       该芯片采用夹心法，其原理是将捕获抗体预先固定在固相载体上，生物样品加入到芯片上一起孵育反应后，其特异性的抗原与捕获抗体结合，然后加入生物素标记的检测抗体一起孵育，通过HRP-链霉亲和素与化学发光底物、或者荧光染色剂-链霉亲和素结合作为信号检测。基于“三明治”双抗体夹心法建立的芯片，高品质的抗体对是此方法的关键，夹心法有很高的灵敏度，检测浓度可以低至1-10 pg/mL;每增加检测一个蛋白，芯片上就需要增加一个抗体对，这样可能出现交叉反应，因此需要将每个抗体对与芯片上其他抗体对进行检测，验证是否可以引入这个抗体对，且不对其他抗体对检测造成干扰，通过优化筛选将交叉反应降到Z小。
 
       由于抗体对之间可能存在的相互影响，夹心法抗体芯片一次性检测蛋白的数量有所限制，但是可以用于蛋白的定量检测。目前，RayBiotech验证配对的抗体对有大于600种抗体对，基于双抗体夹心法开发的半定量芯片有40多种，定量抗体芯片有大于45种，涵盖的因子450多个，包括炎症因子、凋亡因子、生长因子、肥胖因子、血管因子、信号转导磷酸化、白介素等等各个疾病相关的因子。夹心法芯片具有特异性好、灵敏度高、重复性和稳定性好的优点。
 

二、实验原理图：
 

 

      

 
三、芯片载体的区别和选择：

RayBiotech 的芯片共有2种载体，一种是膜载体，一种是玻片载体。

1. 膜载体，就类似于Western Blot 实验采用的NC膜或PVDF膜，采用ECL化学发光作为显色信号，这种膜载体相对玻片载体使用时，需要等多一些样品用量，但凡是可以用于WB实验室的都可以使用RayBiotech的膜芯片，通用性高。

2. 玻片载体，是采用载玻片一样的玻璃片作为芯片载体，用Cy3或Cy5，绿色荧光信号作为显色信号，样品用量少，但需要与基因芯片通用的荧光扫描仪。