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大鼠髓鞘相关糖蛋白(MAG)ELISA kit- 科研供应商需要留意的基本事项:正式实验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制实验条件,待检样品应作一式二份,以确保实验成果的准确性。有时本底较高,阐明有非特异性反 应,可选用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
※ 在elisa中,进行各项实验条件的挑选是很重要的,其中包括:① 包被抗体(或抗原)的挑选:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时刻及其蛋白 量也有一定影响,一般多选用4℃ 18~24小时。
② 固相载体的挑选:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是 40孔聚苯乙烯凹孔板。
③ 酶符号抗体作业浓度的挑选:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶符号抗体部份)。
④ 酶的底物及供氢体的挑选:对供氢体的挑选要求是价廉、安全、有明显地显色反响,而自身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌效果,应留意 防护。
一般在底物效果时刻,以10-30分钟为宜。底物运用液必须新鲜制造,尤其是H2O2在临用前加入。
实验室使用人员时,应考虑以下条件:A 有颜色视觉障碍的人员不能执行某些涉及到辨色的试验。
B 实验室人员应熟悉生物检测安全操作知识和消毒知识。
C 实验室应对在培人员实施有效监督。
D 实验室应对新员工进行检测技能的培训,对新员工的检测技能进行确认。
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