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描述:
在15分钟内分离完整的mRNA转录物组。该mRNA分离磁珠试剂盒可以从总RNA中特异性的识别和捕获mRNA分子。由于真核细胞总RNA中的mRNA的含量仅有约1-5%,因此我们推荐直接从原始的裂解液中直接分离mRNA(见:610-11,610-12)。因为使用其他方法提取总RNA的时候,约80%的产物是核糖体RNA,因此就迫使mRNA与核糖体RNA,转运RNA,小RNA,核小RNA和胞质小RNA竞争与膜的结合。
l 提取过程15分钟,得到的mRNA完整且纯度高;
l 分离出来的mRNA纯度非常高,是用于cDNA合成的Z好选择;
l 分离mRNA的过程非常精细,因此可以从非常小的起始样本终分离用于cDNA合成和cDNA文库构建的mRNA。(可以从1个细胞进行cDNA文库的构建)
Dynabeads® mRNA 纯化试剂盒中包被有oligo dT 25的磁珠可以从真核生物的总RNA中特异性的标记、捕获和纯化mRNA转录物组。核糖体RNA、DNA、蛋白质和小RNA(如转运RNA、小RNA和核小RNA)都不与磁珠结合,只有多腺苷酸化的RNA(mRNA)才能被捕获。分离到的mRNA纯度很高,不需要去除核糖体RNA。
可以从所有真核物种的总RNA中纯化mRNA: l 从全血、血浆、血清和痰中制备的总RNA; l 细胞、血清和血浆中病毒的多腺苷酸化RNA; l 哺乳动物、两栖类动物、鱼和昆虫的组织:大脑、肺、肝脏、肚子、心脏、肾脏、垂体、、卵巢、肌肉、下丘脑、卵子、整体昆虫等。 l 植物组织:整体植物、芽、保卫细胞(单个细胞)、胚胎、花、叶、胚珠、根、种子(糊粉,胚乳),柱头等; l 甲醛固定和石蜡包埋的组织; l 啤酒酵母; l 未分级的核酸样本(DNA +总RNA)。 mRNA可用于所有的下游分子分析: l 基因克隆; l cDNA合成,cDNA文库构建; l RT-PCR,定量RT-PCR; l RPA-RNAase保护实验; l 扣除杂交; l 引物延伸; l SAGE、RACE等。 不需要柱子的系统,可以保证转录物组的得率: l 通过移动的磁珠物理捕获mRNA; l 操作过程快速温和; l 在高离心力的离心过程中没有mRNA的损失; l 在过柱法的洗脱过程没有mRNA留在柱子中。 是Z理想的分离用于cDNA文库构建的mRNA的方法: l 可以保证转录物组的得率和富集程度; l 与必须要提取总RNA后才能分离mRNA的过程相比,能够捕获更多的转录物组。 Dynabeads在溶液中的移动性很好,因此在mRNA捕获阶段的时候,磁珠的mRNA捕获面可以自由持续的与整个体积的样本反应。在随之的分离阶段,磁珠在强大的磁场作用下被拉到管子的壁上,因此可以用移液枪将上清方便和完全的移走。之后的清洗步骤也很容易进行。得到的mRNA不含有任何其他种类的RNA。 多种洗脱选择: l 可以用任意体积的洗脱液,Z少为5µl; l mRNA洗脱过程是可选择的: Dynabeads不会YZ下游的酶反应过程; 可以在磁珠上直接进行cDNA的合成,然后建立一个可重复使用的固相cDNA文库。 内容: 2ml磁珠,5 mg/ml;缓冲液。 储存: 2-8度 |
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温馨提示:不可用于临床ZL。