大鼠模型脑组织耐药蛋白乳腺癌耐药蛋白(BCRP)elisa试剂盒

使用方法
        大鼠模型脑组织耐药蛋白乳腺癌耐药蛋白(BCRP)elisa试剂盒新闻头条以上皮特异性细胞粘附分子(epithelial cellular adhesion molecule,EpCAM)为标志,用实时定量PCR的方法检测转移性乳腺癌循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)。方法:以实时定量PCR的方法检测47例转移性乳腺癌患者及20例健康志愿者EpCAM mRNA的表达,并与原发灶病理特征、转移部位、LX和疾病进展时间(time to progression,TTP)做相关分析。结果:化疗前和第1周期化疗后转移性乳腺癌患者的EpCAM mRNA阳性率分别37.8%和42.6%,20例健康志愿者均为阴性。转移性乳腺癌患者生存分析显示,第1周期化疗后,EpCAMmRNA阳性的患者与EpCAM mRNA阴性的患者相比,中位TTP明显缩短,分别为7.1个月和11.1个月(P=0.013)。亚组分析显示,一线和二线化疗的患者,TTP存在明显差别(P=0.018),而三线及三线以上化疗的患者TTP无明显差别(P=0.471)。结论:转移性乳腺癌中,EpCAM mRNA的阳性率约为40%。第1周期化疗后,EpCAMmRNA阳性的患者中位TTP明显缩短。采用直接法熔融缩聚制备L-乳酸（L-LA）和乙醇酸（GA）共聚物。先是以摩尔比为90／10的L-LA和GA为原料生成低聚物，然后L-LA和GA低聚物在双催化剂二水合氯化亚锡和对甲苯磺酸的催化下进一步反应。在反应中，未使用任何有机溶剂。反应产物的性能和结构通过核磁共振（NMR）、差示扫描量热（DSC）等手段进行表征。结果表明，OA显示了比L-LA更高的反应活性，聚合过程中可能通过酯交换减少了GA和LA嵌段长度，而且随着GA含量和反应时间的增加会使共聚物产生更多的消旋，并使结晶度下降。目前反应条件下进行了嵌段共聚而非随机其聚。结果也表明，相对分子质量较高的L-LA和GA共聚物是可以通过直接聚合在适宜的工艺条件下制得。烟碱型乙酰胆碱受体(Neuronal nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs)是一类广泛分布于及外周神经系统的配体门控离子通道受体。α6β2~*nAChRs是其中重要的一种亚型,其作用与尼古丁成瘾、运动功能性障碍相关,是研究和ZL相关疾病的重要靶点。α-芋螺毒素(Conotoxin,CTx)TxIB是从海南产织锦芋螺(Conus textile)中发现的,能特异作用于α6β2~*nAChRs,其半阻断剂量(IC_(50))为28 nM。TxIB除了阻断α6β2~*亚型外,对其他已知的nAChRs亚型几乎都没有阻断活性,是迄今对α6β2~*9nAChRs选择性Z好的阻断剂,可用于区分α6β2~*与其他nAChRs亚型,并可作为研究α6β2~*nAChRs结构和功能的重要探针。目前获得芋螺毒素多肽通常采用化学合成的方法,但由于合成成本高、产率低,限制了其大规模研究应用。本研究利用生物合成的方法,将TxIB的基因片段连接到大肠杆菌表达载体pET-31b(+)上,获得的重组载体转入大肠杆菌BLR(DE3)pLysS进行表达,利用镍离子金属鳌合亲和层析技术对目的产物进行分离纯化,用生物法成功合成重组蛋白KSI-TxIB-His_6。

标本要求
        大鼠模型脑组织耐药蛋白乳腺癌耐药蛋白(BCRP)elisa试剂盒新闻头条利用溴化氰(Cyanogen bromide,CNBr)切割技术,去除了融合蛋白中的酮类固醇异构酶(Ketosteroidisomerase,KSI)和His-tag组氨酸标签,并通过GX液相色谱技术(HPLC)分离纯化了重组芋螺毒素TxIB(rTxIB)。利用双电极电压钳技术,对rTxIB的活性进行鉴定,结果表明,rTxIB能专一性作用于α6β2~*nAChRs,IC_(50)为89 nM,与天然TxIB的活性接近。该研究成功利用大肠杆菌表达了α-芋螺毒素TxIB,并对rTxIB的活性进行了检测,该研究结果可为其他芋螺毒素的生物法合成提供方法借鉴。肝纤维化是指肝纤维组织的过度沉积,系细胞外基质的合成与降解失去相对平衡的结果,是慢性肝病Z主要的病 理特征之一,是肝硬化的早期和必经的阶段.随着分子生物学和细胞分离技术的进一步发展,人们对肝纤维化的发生、发展的认识更全面、更深刻,经研究证实肝纤 维化是可以逆转的,为肝纤维化的有效ZL带来了希望.经过多年的实验研究和临床研究,发现中药抗肝纤维化具有良好前景和潜在优势.该课题以中医理论为指 导,结合现代医学,对在临床上ZL肝炎、肝硬化血吸虫病及热病后所致肝脾肿大有一定的LX的、《金匮要略》中ZL疟疾癓瘕的名方"鳖甲煎丸"进行实验研 究,探讨其抗肝纤维化的作用,观察其对细胞外基质、肝组织内胶原及胶原酶的影响,为临床FZ肝纤维化提供科学的依据.该实验以猪血清诱导免疫性雄性 Wister大鼠为研究对象,以大鼠血清学指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清白蛋白(ALB)、白蛋白/球蛋白(A/G)、透明质酸(HA)、层粘蛋 白(LN)、Ⅲ型前胶原(IV-C)、肝组织胶原酶活性及Ⅰ、Ⅲ胶原(ColⅠ、 Ⅲ)及肝组织HE常规染色等作为主要观察内容,以秋水仙碱作为阳性对照,正常对照组作为阴性对照,将大鼠随机分为6组;正常对照组(简称正常组)、病理模 型对照组(简称病模组)、鳖甲煎丸预防组(简鳖预组)、鳖甲剪丸ZL组(简称鳖治组)、秋水仙碱预防组(简称秋预组)、秋水仙碱ZL组(简称秋治组),除 正常对照组外,其余各组采用猪血清腹腔注射诱发肝纤维化,0.5ml/只,每周2次,预防组于造模同时给药,ZL组于造模第6周给药,连续造模10周后取 材进行研究.实验结果表明:鳖甲煎丸能显著降低免疫性肝纤维化大鼠血清ALT的含量,升高血清ALB,恢复A/G比值.鳖预组和鳖治组与正常组比较无显著 性差异(P>0.05);鳖预组、鳖治组与模型组相比均有显著性意义(P0.05);血清肝纤维化指标HA、LN、PC Ⅲ、IV-C含量的变化与肝组织病理改变结果相一致.免疫组化肝组织ColⅠ、 Ⅲ显示鳖预组、秋预组、秋治组、鳖治组与病模组相比有极显著性差异(P0.05);对肝组织羟 脯氨酸的测定显示病模组、预防组、ZL组羟脯氨酸的含量依次ZG,表明胶原酶的活性依次ZG.肝组织HE染色病理改变分级资料显示鳖治组、秋治组与病模组 相比有极显著性差异(P<0.05).结论:鳖甲煎丸YZ细胞外基质合成并促进胶原纤维的降解.其作用结果优于秋水仙碱.

 注意事项
        大鼠模型脑组织耐药蛋白乳腺癌耐药蛋白(BCRP)elisa试剂盒新闻头条慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是不完全可逆性气流受限,是一种慢性呼吸性系统疾病,气道壁和肺实质的炎症及结构损伤是其病理学基础。随后引发气道狭窄、肺气肿形成和进行性气流阻力增加,出现气道重塑的病理改变。近年来,在兽医临床,有病犬出现了类似慢性阻塞性肺疾病,如有些犬的肺心病。为了探讨犬COPD中兽YZ疗,本实验设计以中兽医理论指导,采用辩证对慢性阻塞性肺疾病进行白针针刺穴位和口服中药ZL。中YF剂组成以宣肺滋阴,ZK平喘为组方原则,YF主要用生地黄,贝母,麦冬,芦根,白芍,炙百部,川芎,当归,山药,五味子,甘草组成,针灸采用关元、合谷、曲池、肺腧穴位。观察COPD模型大鼠的临床治LX果和部分血液生化指标变化。试验用ELISA试剂盒检测了正常对照组大鼠及COPD模型大鼠血清中细胞外基质成分透明质酸(HA)和层粘连蛋白(LN)含量,紫外分光光度试剂盒检测血清和肺组织匀浆液中脂质过氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽含量(GSH)和总超氧化物歧化酶活力(T-SOD),ELISA试剂盒法检测细胞因子白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-y)水平；利用石蜡切片观察针刺ZL和中YF剂ZL对COPD模型大鼠肺组织形态学的影响。结果表明： 1.针刺作用穴位关元、合谷、曲池和肺腧后,COPD模型大鼠血清中HA,IL-8和LPO含量降低,肺组织匀浆液中IFN-y和MDA含量降低。 2.中YF剂清肺滋阴散加减口服使COPD模型大鼠血清中HA、LN、IL-8、TNF-α、IFN-γ、MDA和LPO含量降低,SOD比活力提高；使肺组织匀浆液中IL-8、TNF-α、IFN-γ、MDA和LPO含量降低,SOD活力提高。 3.针刺同中药配合使用,COPD模型大鼠血清中HA、LN、IL-8、TNF-α、IFN-γ、MDA和LPO含量降低,SOD比活力提高；使肺组织匀浆液中IL-8、IFN-γ和MDA含量降低,GSH含量提高,SOD活力提高。 4.ZK平喘方以及针刺在一定程度上可以减轻COPD大鼠肺组织形态学病变,且中药与针刺配合使用效果更好。 5.针刺和中YF剂口服ZLCOPD模型大鼠,是通过提高机体抗氧化能力,减少炎症反应,降低细胞外基质对机体影响来实现ZL的。结果表明,中YF剂LX好于针刺ZL,但是配合针刺ZL以后,对于症状缓解更有帮助。本文应用海马脑片和单细胞电生理技术研究了δ-氨基酮戊酸(δ-aminolevulinic acid or δ-aminolevulinate，ALA)对急性分离的大鼠海马CA1区神经元上电压门控钠通道的作用，以及ALA引起的突触可塑性和突触传递效能的变化，并探讨了其可能的作用机制。 技术和方法：单细胞和脑片膜片钳技术，脑片场电位技术 实验结果： 1) ALA对大鼠海马CA1区神经元上电压门控钠通道的作用 在阻断了电压门控型钾通道和钙通道的情况下，可以在急性分离的大鼠海马CA1区神经元上记录到对TTX敏感的电压门控钠通道电流。结果表明，低浓度的ALA能够增加钠电流的幅度，高浓度的ALA则降低钠电流的幅度，且这两种效应皆是不可逆的。低浓度ALA对钠电流幅度的增强作用可被抗氧化剂完全阻断，而高浓度ALA对钠电流幅度的YZ作用也可被抗氧化剂部分阻断。不同浓度的ALA都显著地延缓了通道的复活时间，并可被抗氧化剂部分逆转。

代测服务
        大鼠模型脑组织耐药蛋白乳腺癌耐药蛋白(BCRP)elisa试剂盒新闻头条这些结果充分说明了过氧化效应参与了ALA对钠通道的调控。不同浓度的ALA均可使钠通道的激活和失活曲线向超极化方向移动，降低钠通道开放的阈值，从而提高神经细胞的兴奋性，并且这一作用不能被抗氧化剂逆转，说明ALA的作用还涉及到其它未知的通路。鉴于ALA实际上是一种GABA的结构类似物，且阻断GABAa受体后对ALA的作用没有显著性地影响，而单独激活GABAb受体却能模拟出与ALA相似的作用，说明ALA有可能通过激活GABAb受体来产生其它的胞内作用。此外，ALA对钠通道的调控作用不具有通道状态依赖性。 2) ALA对大鼠海马CA1区锥体神经元突触可塑性及自发性突触后电流的作用 由于神经元兴奋性和突触后动作电位发放在突触可塑性的调节中具有至关重要的作用，我们应用脑片膜片钳技术对ALA在突触水平上的作用及机制进行了研究。结果表明：在突触前，ALA增加了双脉冲易化效应，说明ALA增加了突触前递质的释放；在突触后，ALA持续性地增加了fEPSPs的幅度，表明ALA能够改变突触传递特性，自身能够诱导LTP，并且这种作用几乎可被NMDA阻断剂完全阻断。 通过分析自发性突触后电流发现，ALA均可降低兴奋性和YZ性突触后电流的频率，但却能够增加它们的平均幅度。这一结果表明，ALA虽然降低了突触前囊泡释放的频率，却因为增加了每一次释放的囊泡数目而使递质的释放量依然得到了增加。此外，ALA对兴奋性和YZ性突触后电流的平均衰减时间都没有显著性地影响，说明ALA对突触后膜上的受体可能并没有直接作用，这一点需要进一步探讨。 综上所述，ALA能够通过调节电压门控钠通道的开放特性而增强神经元的兴奋性和动作电位的发放；另一方面，ALA还可增加突触前递质的释放量，增加突触强度，提高突触传递效能，从而诱导产生LTP，影响神经元的突触可塑性。COPD发病机制未完全明了,越来越多的研究结果表明,细胞凋亡参与COPD的形成过程.肺表面活性物质相关蛋白质-D（pulmonary surfactant associated protein,SP-D）缺失可诱导鼠自发形成肺气肿,提示SP-D在COPD的发病机制中起重要作用.本研究旨在研究肺泡间隔细胞凋亡是否与SP-D的表达有关.观察肉桂对2型糖尿病大鼠肝糖原、肌糖原的影响,探讨其改善胰岛素抵抗的机理。方法:采用小剂量静脉注射STZ并喂养高热量饮食办法建立动物模型。动物分为糖尿病组、糖尿病肉桂ZL组和正常对照组。糖尿病肉桂ZL组大鼠喂药2周,检测各不同处理组空腹血糖、葡萄糖耐量、血胰岛素、肝糖原、肌糖原的水平。结果:糖尿病组大鼠与正常组大鼠肝糖原相比显著下降(P0.01),同时肌糖原也明显下降(P0.05)。而糖尿病肉桂ZL组大鼠肝糖原、肌糖原与糖尿病组大鼠相比皆明显增加(P0.05)。结论:肉桂可以增加2型糖尿病大鼠肝糖原、肌糖原储存量,从而提高外周组织对葡萄糖的利用,改善2型糖尿病大鼠的胰岛素抵抗。