详细说明: 本产品为加拿大MOSS公司分装产品。本品提供了ELISA 实验中所需的全部底物溶液,开瓶即用,操作简单。该底物溶液含TMB、H2O2和特殊的催化剂和稳定剂。3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)是辣根过氧化物酶(HRP)的一种新型底物。氧化前 TMB 的光吸收在 285nm 处,氧化后的光吸收波长是 370nm 和 652nm。建议在 652nm 处测定蓝色光吸收;加酸将使蓝色转变为黄色,可以在 450nm 处读数,450nm 处检测的灵敏度高于652nm 处。建议底物氧化反应后加 100μl 终止液,使蓝色转变为黄色后在 450nm处进行测定。TMB显色灵敏度要远高于传统的底物如OPD和ABTS,并且背景较低。 操作步骤: 1. 用PBST (NaCl 150mM,,phosphate 20mM, Tween20 0.1%, pH7.5) 洗净HRP未结合的标记物(抗体,凝集素,核酸,等)。 2. 按100ul/孔加入TMB,轻轻晃动混匀,避光室温孵育30分钟。 3. 按100ul/孔加入2 M H2SO4,立即于450nm读数。 |