德国Biontex转染试剂

第五部分：真核细胞转染试剂
一、代理德国Biontex 公司的转染试剂
Biontex 公司成立于1998年，其总部位于德国慕尼黑附近的Martinsried，专注于转染试剂的研发和应用。
 
（一） K2^® Transfection System ，Biontex产品
全新GX的哺乳动物细胞DNA和mRNA转染工具
 
 
  
产品特点：

1. 通过YZ细胞对外源DNA的免疫反应来提高转染效率，特别适用于转染人类细胞
2. 多数情况下，比其他常见转染试剂（如，Lip2K）有更高转染效率
3. 细胞毒性较低

 
真核细胞依赖自身的先天性免疫系统，能够识别并YZ外来物质（如脂多糖、细菌、病毒核酸及蛋白质）的入侵。此外，细胞还可以将这些外来物质的信息通过信号分子传导给相邻的细胞，使这些临近细胞在无需接触病原体的情况下产生防御体系。
为降低细胞自身的免疫反应，提高基因转染效率，Biontex公司开发了K2® Transfection System，由K2^® Transfection Reagent 和 K2^® Multiplier两部分组成。K2^® Transfection Reagent是一种GX的阳离子脂质，而K2^® Multiplier则可以降低细胞对外来核酸及脂质体的免疫反应。
 
应用实例1：

Transfection efficiency of pCMV-GFP by K2^® Transfection System and Metafectene Pro compared with a commercial transfection reagent L2k with several cell lines.
  
应用实例2：


产品订购信息：

产品名称	货号	规格	价格
K2® Transfection System	T060-8.0	1.5 ml Transfection reagent 6.5 ml Multiplier	3770
K2® Transfection System	T060-8.2	2 X 1.5 ml Transfection reagent 2 X 6.5 ml Multiplier	7020
K2® Transfection System	T060-8.5	5 X 1.5 ml Transfection reagent 5 X 6.5 ml Multiplier	16580

 
 
 
 
 
 
 
 
（二）METAFECTENE^® SI⁺
特别适合于siRNA或miRNA mimic/inhibitor的GX转染试剂

特点:

• 整合了RMA和TOP技术
• 沉默效率更高，siRNA用量更少
• 操作简便、快速，适合大规模筛选

 
 
 
METAFECTENE^® SI⁺是一种脂质复合物，经特殊优化适用于siRNA和microRNA转染（siCOM技术），综合了Biontex公司RMA和TOP技术的特点，具有沉默效率高、RNA聚合和毒性低等优点，适用于所有细胞系和原代细胞。
 
siCOM技术(siRNA adjusted Composition)
不同于一般的DNA转染试剂，本技术不需要将siRNA和miRNA转运到细胞核。因此，METAFECTENE^® SI⁺主要目的在于化的内吞作用并快速完全释放RNA进入细胞质。
 
Sequence of expression of GFP in HeLa-GFP cells transfected with METAFECTENE® SI+ and siRNA directed against the mRNA of the GFP. Clearly visible is the reduction in GFP expression to a maximum knockdown at 72 hours.
产品订购信息：

产品名称	货号	规格	价格
METAFECTENE® SI+	T100-1.0	1 ml RNA transfection reagent 2 ml SI+ buffer (10x)	3692
METAFECTENE® SI+	T100-2.0	2 X 1 ml RNA transfection reagent 2 X 2 ml SI+ buffer (10x)	7072
METAFECTENE® SI+	T100-5.0	5 X 1 ml RNA transfection reagent 5 X 2 ml SI+ buffer (10x)	16393

 
 
 
 
（三） METAFECTENE® EASY
更快、更简便、更GX的转染技术

特点：

1. 快速：一次转染实验只需3天
2. 简便：优化条件时，只需摸索两个固定的  DNA:lipid比例
3. GX：升级产品提高了转染效率，进一步降低毒性
4. 经济：EASY⁺的显著特征，EASY⁺降低了核酸复合物(DNA +脂质)所需要的体积，节约至少50%的成本

 
在开发第二代DNA转染试剂（METAFECTENE^®及其升级版本METAFECTENE^®PRO）的时候，Biontex的主要目标是化转染效率(RMA技术)和Z小化毒性作用(TOP技术)。进一步开发的Biontex FEE技术预示着第三代质粒转染试剂的开始：METAFECTENE^® EASY⁺。
 
FEE技术
FEE技术是优化的具更高转染效率的技术，通过固定DNA /脂质体比率和转染复合物体积而适用于广泛的细胞类型。不需要针对每种细胞类型进行费时、费力的条件优化。

METAFECTENE® EASY achieves transfection efficiency rates comparable to those of METAFECTENE® PRO without the need to optimize the DNA/lipid ratio (dark blue columns: COS-7, light blue columns: HeLa cells).
 
产品订购信息：

产品名称	货号	规格	价格
METAFECTENE® EASY+	T090-1.0	1 ml Transfection reagent 2 ml EASY+ buffer (10x)	3484
METAFECTENE® EASY+	T090-2.0	2 X 1 ml Transfection reagent 2 X 2 ml EASY+ buffer (10x)	6539
METAFECTENE® EASY+	T090-5.0	5 X 1 ml Transfection reagent 5 X 2 ml EASY+ buffer (10x)	21697

 
 
 
 
（四）METAFECTENE^® PRO
真核细胞的GX、低毒性转染试剂

METAFECTENE^® PRO是针对哺乳动物细胞的新一代转染试剂。采用毒性优化专利技术（TOP技术），Biontex成功地降低了转染试剂对细胞的毒性，并显著提高DNA进入细胞的效率。除了能加强细胞的转染效率之外，METAFECTENE^® PRO的另一个主要特点是提高细胞内基因的表达。
 
 
TOP技术(Toxicity Optimization Module)
    毒性Z小化是现代转染试剂达到效率和广泛应用性的首要前提条件。TOP技术的基本准则是模拟物质天然结构，加强生物降解能力，提高细胞耐受性。另外，通过物理化学修饰，降低脂质复合体的稳定性，从而促进DNA在细胞质的释放。


 Comparison of transfection efficiency of METAFECTENE^® PRO with various cell lines (METAFECTENE^® )

产品订购信息：

产品名称	货号	规格	价格
METAFECTENE® PRO	T040-1.0	1 ml Transfection reagent	3042
METAFECTENE® PRO	T040-2.0	2 X 1 ml Transfection reagent	5915
METAFECTENE® PRO	T040-5.0	5 X 1 ml Transfection reagent	13728

 
 
 
（五）METAFECTENE^®

1. METAFECTENE^®是一种基于脂质体的包含阳离子和中性脂质的复合物，在DNA转染哺乳动物细胞时达到很高的转染效率。属于第二代转染试剂。
2. 的RMA技术是GX转染率的保证。另外，METAFECTENE^®的低毒性和耐受血清YZ等特性使其具有广泛的应用空间。

 
 
RMA技术(Repulsive Membrane Acidolysis)
排斥膜酸水解（RMA）专利技术，一方面能促进细胞内涵体中“质子海绵”的活性，另一方面能促进脂质体复合物分解，通过小片段质子化结构模拟磷脂结构。当内涵体处于酸性环境时，正电荷累积在脂质体复合物的磷脂双分子结构中，通过电荷的排斥力，这些电荷引起脂质体复合物的分解，同时GX地将DNA/RNA释放到细胞质中。
，胞质中非络合的DNA/RNA急剧增多，以DNA为例，这个结果导致其在胞质中的活性显著提升，DNA与细胞核接触的可能性增加，从而大大提高转染效率。
 
产品订购信息：

产品名称	货号	规格	价格
METAFECTENE®	T020-1.0	1 ml Transfection reagent	2470
METAFECTENE®	T020-2.0	2 X 1 ml Transfection reagent	4511
METAFECTENE®	T020-5.0	5 X 1 ml Transfection reagent	10100

 
 
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产品名称	产品介绍	规格	货号	价格
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二、自主生产的转染试剂：HTfect transfection kit
 
HTfect transfection Kit是盎然生物技术有限公司研发的一种GX、低毒、廉价且重复性好的新型转染试剂，适用于大部分细胞类型。本产品特别适合于HEK293、HeLa、HT1080等细胞的转染，在重组蛋白表达，病毒包装， microRNA靶基因3’-UTR分析、co-IP等实验中用途广泛。同时，本产品也不受血清的干扰，实验操作简单。
产品优势

1. 转染效率高，尤其对HEK293T细胞的转染效率高达95%以上。
2. 细胞毒性小，显著低于L2K等试剂。
3. 转染过程中无需更换无血清培养液，操作简单。
4. 性价比高，特别适合大规模转染实验，如表达重组蛋白或者包装病毒等。
5. 结果重复性好。

使用实例
  用HTfect transfection kit 将3 μgpLVX-cmyc-EGFP质粒转染HEK293细胞，两天后使用Olympus倒置荧光显微镜（IX71）进行观察和拍照。（左图为明场细胞图像，右图为绿色荧光细胞图像）。
 
 
产品订购信息：

产品名称	货号	规格	价格
Htfect transfection kit	AB-TP1001	Sol.A   1.25 ml Sol.B    20 ml	765
Htfect transfection kit	AB-TP1002	Sol.A   2.5 ml Sol.B    40 ml	1445
Htfect transfection kit	AB-TP1003	Sol.A    5 ml Sol.B    80 ml	2750