Real-time PCR检测

1.C．Real-time PCR检测
原理和过程：实时荧光定量PCR（Real-time Quantitative PCR，Real-time PCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，从而对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR过程中，荧光染料能特异性掺入DNA双链，发出荧光信号，而不掺入双链中的染料分子不发出荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物增加完全同步。实时荧光定量PCR技术是一次DNA定量技术的飞跃，运用该项技术，可以对DNA 、RNA样品进行定量和定性分析。
 
客户提供材料：
1. 进行mRNA表达量分析时，如果提供的材料为Total RNA，请寄送足量的并且  保证纯度的Total RNA(浓度在200 ng/μl以上，体积在20 μl以上，纯度A260/280在1.8-2.0间)。如果目的基因表达量低时，应尽量提供更高浓度的Total RNA。
2. 如果提供的材料为细胞或组织，RNA的提取费用另收。同时应保证材料新鲜，动物细胞数为10⁶以上，动物组织为100 mg以上。
3. 如为质量合格的cDNA ，   按照每个样品一个基因6ul的量准备，因为一个基因要做3个复孔，外加内参反应做3个复孔，6ul是要求。
4. 引物，10μmol的终浓度，按照每个样品一个基因3μl的量准备。若没有合成好的引物，则我们代为设计、合成，收取一定费用。      
5. 目的基因信息(GenBank Accession number、Gene ID、或关键词)。
 
流程和费用计算：

 
 

公司网址：www.pregene.com数量算法： 样品数= （       ） 基因数= （       ） 基因检测与分析个数= 样品数X基因数 举例： 6个样品，检测3个基因 RNA提取：6x160=960元 反转录：6x100=600元 引物设计、合成：3x80=240元 基因检测与分析：18x120=2160元 总计：3960元

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

实验周期：1-2周提交实验报告
提交结果：
1.    实验报告。
2.    多余的引物，样品可以退还。如果客户没有及时要求退还，课题结题、保存一个月后，我们会丢弃。