iTRAQ实际上是一种同位素标记试剂,包括一个带电荷的报告基团(reporter group),另外还有一个肽段反应基团(peptide reactive group)和一个平衡基团(blance group)。其中,报告基团分为4种和8种分子量,4种的分别为114,115,116,117;8种的分别为113,114,115,116,117,118,119,121。平衡基团的作用是平衡分子量,以保证蛋白多肽与每一种报告基因结合后iTRAQ试剂总的相对分子量都是145,肽段反应基团可以同肽段的N末端和赖氨酸测量E氨基基团发生反应,这样可以标记生物样品中产生的所有肽段,增强任一给定蛋白的肽段覆盖度,同时保留了诸如一些蛋白的翻译后修饰的重要结构信息。
TMT (Tandem Mass Tags,同质异序标签),是由Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术。TMT标签是多个不同形式且带有相同分子量的标签,这些标签可以通过活性基团,标记到肽段分子上。TMT试剂根据反应基团分为氨基反应性、巯基反应性、羰基反应性试剂,同时试剂标记通量分为2标、6标和10标,可同时对Z多10种不同样品中蛋白质进行定性和定量分析。