【流感病毒分离无血清培养基 用途与描述】
在使用MDCK细胞培养分离流感病毒的操作中,流感病毒分离无血清培养基用于接种流感病毒后,维持MDCK细胞生长。
特别说明:
1. 该产品在使用前需要添加终浓度为2ug/ml的TPCK-胰酶和双抗(青霉素终浓度100U/ml;链霉素100ug/ml)。
2. 在流感病毒分离中,需配套使用MDCK细胞无血清培养基(NC0201),方能在24h小时内观察到细胞病变和分离到流感病毒。
【流感病毒分离无血清培养基 规格与保存】
产品货号 | 产品名称 | 产品规格 | 保存条件 | 有限期限 |
NC0204 | 流感病毒分离无血清培养基 | 500mL/瓶 | 2-8℃保存 | 12个月 |
【流感病毒分离无血清培养基 主要成分】
在基础培养基之上,添加了一些适合维持MDCK细胞生长和流感病毒快速复制需要的组分,以达到快速分离出流感病毒。
【流感病毒分离无血清培养基 使用方法】
流感病毒的分离与培养
1) 选取融合度90%-100%且处于对数生长期的MDCK细胞,弃去培养液,用PBS或不含钙镁的Hank’s液清洗细胞2-3遍。
2)加入200 μL的流感病毒样本,温和摇动数次。
3)置于37℃,5% CO2培养箱中吸附1-2小时。
4)吸出接种物,加入6 mL流感病毒分离无血清培养基(使用前需要添加抗生素及终浓度为2ug/mL的TPCK-胰酶)于培养瓶中,放置于33℃-35℃,5%CO2培养箱中培养,每日观察病变。
5)当75%-的细胞出现病变时即可准备收获病毒。
6)温和摇动细胞瓶2-3次。将培养瓶中的病毒液置于15mL离心管中。
7)为了提高病毒滴度,可将离心管置于-70度冰箱或液氮上方反复冻融一到两次。
8)收获的病毒液可立即进行血凝试验,或负80度冰箱冷冻长期保存。
【MDCK细胞培养操作视频】
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【MDCK细胞接种病毒后的细胞状态】
接种流感病毒后,无血清培养基对MDCK细胞维持能力强。
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病毒接种24h时 MDCK细胞状态 | 未接种病毒, 24h时MDCK细胞状态 | 病毒接种48h时 MDCK细胞状态图片 | 未接种病毒, 48h时MDCK细胞状态 |
温馨提示:不可用于临床ZL。