供应商:
天漠科技
英文名:
TIANMO BIOTECH
保质期:
1年
保存条件:
室温
规格:
50次
快速质粒DNA小量提取试剂盒 Catalog No. TD436-50 (50次反应) TD436-100 (100次反应) TD436-200 (400次反应) Highlights - 无需沉淀菌液,直接从培养菌液中提取质粒DNA。
- 独有的显色反应,可以直接观察到细胞裂解中和的程度,极大方便操作者判断其状态。
产品组成: 试剂盒组成 | 保存 | 50次 | 100次 | 400次 |
质粒DNA裂解液(蓝色) | 室温 | 6ml | 12ml | 48ml |
质粒DNA中和液(黄色) | 室温 | 20 ml | 40 ml | 160 ml |
质粒DNA预洗液 | 室温 | 15 ml | 30 ml | 120 ml |
质粒DNA洗涤液 | 室温 | 10 ml 15 ml 25 ml 次使用前按说明加指定量乙醇 |
质粒DNA洗脱液 | 室温 | 10ml | 20ml | 30ml |
2号柱 | 室温 | 50个 | 100个 | 400个 |
收集管(2ml) | 室温 | 50个 | 100个 | 400个 |
Note –售出后一年内产品质量是可以保证。 试剂已经过大量的常规检测来保证其可操作性。此产品仅供研究并且需要由专业人员来使用。试剂盒中的部分试剂是有刺激性的。 请带好手套和防护眼镜。 注意事项: - 环境温度低时溶液质粒DNA裂解液中SDS可能会析出沉淀,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。
- 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
- RNase A 已经添加到质粒DNA中和液中,请将中和液放置在4-10°保存 ,RNase A的终浓度为200ug/ml
- 溶液质量DNA中和液含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
特性: - DNA 纯度: 获得的质粒产量高、纯度好, 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等
- 质粒DNA产量: 每次可提取到约 25 µg ,主要依据质粒的拷贝数,培养物的成长环境等因素。
- 质粒DNA大小: 可达25 kb。
- 洗脱体积: ≥ 30 µl。
- 操作温度: 室温 (15-30°C)。
溶液制备:(使用之前需要配制) . 10次反应的 质粒DNA洗涤液 已经添加乙醇无需添加。50次反应的 质粒DNA洗涤液 应添加24 ml 的乙醇到6ml的质粒DNA洗涤液中。100次反应的 质粒DNA洗涤液 应添加48 ml 的乙醇到12ml的质粒DNA洗涤液中。200次反应的 质粒DNA洗涤液 应添加192ml 的乙醇到48ml的质粒DNA洗涤液中。 加入后请及时在方框打钩标记,以免多次加入!操作步骤: 以下操作步骤均在室温下操作。乙醇已经添加到质粒DNA洗涤液中。质粒DNA中和液使用前需要放置到4-10°预冷。 - 取600μl过夜培养的菌液直接添加到1.5ml离心管中。(Z多可以处理3ml菌液,a.加入1.5ml菌液速度离心30秒, b.重复步骤a , c.添加600μlTE重悬沉淀)
- 添加100μl的质粒DNA裂解液到同一个1.5ml离心管中,温和地颠倒离心管数次使菌体充分裂解直到溶液完全变成蓝色。(操作此步时间一定要短并且避免剧烈震荡)
- 添加350μl预冷的质粒DNA中和液到上述离心管中,立即温和地上下翻转数次,中和完全后会出现黄色絮状沉淀(反复颠倒数次确保中和完全,中和完全后溶液呈黄色)
- 将上述1.5ml离心管放入离心机中,11,000 – 16,000 x g离心5分钟。
- 将上一步所得上清(~900μl)加入2号柱(柱套在收集管内), 11,000 – 16,000 x g离心1分钟,倒掉收集管中的废液。
- 加入200μl质粒DNA预洗液,11,000 – 16,000 x g离心1分钟,无需倒掉废液。
- 加入400μl质粒DNA洗涤液(请先检查是否已加入无水乙醇!),11,000 – 16,000 x g离心1分钟,弃掉废液。
- 将收集管中的废液倒掉,并将2号柱套回收集管中,在11,000 – 16,000 x g下额外离心2分钟,尽量除去洗涤液, 以免洗涤液中残留乙醇YZ下游反应。
- 取出2号柱,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加30μl质粒DNA洗脱液。(洗脱液事先在 65-70℃水浴中预热,洗脱效果更好),室温放置2分钟,11,000 – 16,000 x g离心1分钟来洗脱质粒DNA。
温馨提示:不可用于临床ZL。