普林斯顿Fluoro·Spin™蛋白荧光标记试剂盒
说明
Fluoro·Spin™蛋白荧光标记试剂盒可以用来标记分子量大于25KD以上的蛋白、酶或抗体。使用活性的FAM (梭基荧光素)、TAMRA (梭基四甲基罗丹明)或ROX (梭基罗丹明)的琥珀酰亚胺基乙酯(NHS)标记蛋白。活化的染料和蛋白的赖氨酸残基之间形成了一个共价的氨基化合物连接体。NHS酯能够比异硫氰酸酯的连接要更加稳定。蛋白和染料的结合体在氩激光的激发下其吸收峰和激发峰同时达到值。
特征及其优点:
1、方便:包括了标记和纯化所需要的所有的组分
2、 快速:整个流程只需要90min
3、 简单:标记然后用离心柱纯化
4、 灵活:可以选择3种结合的染料
5、可伸缩:可以标记100μg、1 mg 或 1.5 mg蛋白
6、结合稳定:氨基化合物间的结合
结合染料的荧光特性
标记染料 e(lmol-1) 吸收波长λ(nm) 发射波长λ(nm)
FAM 45,000 496 520
TAMRA 43,000 555 575
ROX 55,000 585 597
标记和纯化:
活性染料可以标记1.5mg蛋白。每个试剂盒中提供了足够五次标记反应所需要的活性染料。Centri·Sep离
心柱可以将未结合的染料从标记蛋白中除去。现有快速的化的流程用来标记100μg、1mg的抗体或多达
1.5mg的蛋白。 标记某种蛋白所需染料的数量的改变还有更详细的说明。 试剂盒在室温下避光可保存6个月(15C -20°C)。
应用:
荧光素和罗丹明结合物在ELISA、流式细胞术、荧光显微镜、FRET、荧光偏振、各种蛋白定量有关的免疫试验和蛋白蛋白相互作用的检测等方面得到广泛的应用。
试剂盒组分:
每个Fluoro•Spin试剂盒中含有荧光标记和染料标记的蛋白结合物的纯化所需要的所有的组分。每个试剂盒中的组分如下:
Fluoro·Spin试剂盒组分:
组分 形式 数量
NHS Dye Ester 5 vials 0.5 mg each
DMSO 二甲基亚砜 2 vials 1.5 mL each
Sodium Bicarbonate重碳酸钠 5 vials 84 mg each
Hydroxylamine 羟胺 Vials 5
反应管 Tubes 5
Centri•Sep Spin columns 10
Wash Tubes Tubes 10
收集管 Tubes 10
染料连接物与蛋白混合后室温下孵育60min,用羟胺阻断30min。标记的蛋白连接物加到Centri·Sep离心柱子中离心2min回收。
典型的结果: 利用Centri•Sep离心柱可以将通过标准快速试剂盒流程1:3染料蛋白比得到的染料标记的人IgG回收90%以上。
运输与储存:15 - 20°C下可保存6个月。
定购信息:Fluoro·Spin试剂盒及其附带品
连接物 数量 目录编号
FAM•NHS 5 Reactions MK-F0115
FAM•NHS 10 Reactions MK-F0101
TAMRA•NHS 5 Reactions MK-T0118
TAMRA•NHS 10 Reactions MK-T0102
ROX•NHS 5 Reactions MK-R0121
ROX•NHS 10 Reactions MK-R0103
Centri•Sep1 32 Columns CS-900
Centri•Sep1 100 Columns CS-901
Fluoro·Spin是EMP Biotech的商标。Centri·Sep 和Centri·Spin 是Princeton Separations Inc的商标。
温馨提示:不可用于临床ZL。