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产品说明书 |
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产品货号 | 产品名称 | | 规格 | |
TS017 | FastPfu DNA Polymerase | | 250U | |
| 10× FastPfu Buffer | | 300µl | |
| FastPfu DNA Polymerase | | 500U | |
| 10× FastPfu Buffer | | 600µl | |
| FastPfu DNA Polymerase | | 1250U | |
| 10× FastPfu Buffer | | 1.5ml | |
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概述 |
产品简介 | sPrecision FastPfu DNA polymerase是用于PCR扩增的高保真DNA聚合酶,同时具有5'-3'聚合酶活性和3'-5'外切核酸酶活性,因此在聚合反应中可纠正错误掺入的碱基,具有高保真性。经过技术改造,sPrecision FastPfu DNA polymerase扩增速度快(2-3kb/min,是普通Pfu酶的4-8倍),扩增能力强(9kb),克服了普通Pfu酶扩增能力差、产量低和扩增速度慢(0.5kb/min)的缺陷,大大地缩短了反应时间。 |
酶活性单位定义 | One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribo-nucleotides into a polynucleotide fraction(adsorbed on DE-81)in 30 min at 72℃. |
储存条件 | -20℃ | | | |
保质期 | 24个月 | | | |
浓度 | 5u/μl | | | |
特点 | 热启动,高特异性,高扩增速率,高保真。 |
来源 | Pyrococcus furiosus | | | |
应用 | 高保真PCR快速扩增;基因定点突变;长片段扩增;高GC含量模板。 |
酶储存缓冲液 | 20 mM Tris-HCl(pH 8.2), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.1% (v/v) Nonidet P40, 0.1% (v/v) Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。 |
反应buffer | 10x FastPfu buffer,反应时buffer为1×. |
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扩增体系 |
ddH2O | add to25μl | | |
10×PCR buffer | 2.5 | | |
dNTP(2.5mM) | 0.5 | | |
DNA template | 2.2ng/μl | | |
Primer 1 (10µm) | 0.5 | | |
Primer 2 (10µm) | 0.5 | | |
Fastpfu DNA polymerase | 0.5 | | |
| Total | 25μl | | |
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扩增条件 |
94℃ | 2min | | |
94℃ | 0.5min | 25 cycle | |
(Tm-5)℃ | 0.5min | | |
72℃ | 2000bp/min | | |
72℃ | 5min | | |
4℃ | hold | | |
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注意事项 |
1.PCR反应条件应根据模板、目的片段大小、引物结构等具体条件不同,设定反应条件。 |
2. 为了保证保真性,推荐用高质量的dNTPs,不能使用含有dUTP的dNTPs。 |
3.由于酶有外切酶活性,请务必加完反应各组分后,加酶。 |
4.PCR反应各组分应在冰上配置,且加完所有组分后应立即进行PCR反应,以减少由3'-5'外切酶活性引起的引物降解导致的非特异性。 |
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