异葎草酮类(isocohumulone,isohumulone,isoadhumulone)是啤酒花中的天然产物,这些微酸疏水性化合物对啤酒的风味影响很大。但是这些化合物对光线很敏感,所以使用这类原料的啤酒,大多使用深色瓶装,避免造成啤酒变味。也有些啤酒厂家使用上列特别改变的四氢化合物,例如tetrahydroisohumulone, tetraisohumulone, tetrahydroisoadhumulone. 这些化合物对光线就不敏感,所以使用透明的瓶装也不会造成啤酒变味。
这些异葎草酮类化合物在270 nm紫外波长有很强的吸收,所以使用液相色谱和紫外检测器是很理想的分析工具。因为这些化合物对啤酒风味的影响很大,为了保持品质的固定,在啤酒生产过程利用液相色谱进行品管监测这些化合物是非常重要。
在啤酒生产过程中,往往难免还是会有一些不纯物和颗粒会影响到色谱柱的寿命。所以建议Z好在进样分析啤酒生产的中间产品时使用固相萃取(SPE)的前处理来净化,可以减少色谱柱的污染,进而增加柱子的寿命。此外一些厂家也要求固相萃取前处理后的色谱分析时间愈短愈好。
一般使用常规的多孔硅胶柱,分析时间大约在15-20 分钟或是更长,而且峰型不理想。但是如果使用进的“核壳”技术硅胶柱,不但峰型好有助于定量外,同时也大大地减少分析的时间。在这报告中,我们使用常规多孔硅胶和核壳技术的硅胶柱(Kinetex)来进行比较。使用KinetexZ快的可以在4 分钟内分析完毕! 实验简介:
一、固相萃取:使用Strata-X (200mg/mL)。首先将啤酒样品搅拌排气30 分钟。固相萃取小柱以下面程序处理。活化:4 mL 酸化甲醇(1-2mL/min);平衡:4 mL水(1-2mL/min);上样:经过排气过的啤酒5 mL (1 ML/min);清洗:4 mL 40% 的甲醇/水; 干燥:真空(>10“Hg)5分钟以去除多余的水;洗脱:2 mL 酸化甲醇(1mL/min); 完全干燥:氮气在55 C下吹扫;加入500 ul 的液相色谱流动相。
二、液相色谱分析:使用(1)多孔硅胶Nucleosil C18,5u,250x4.6; (2) 核壳技术的Kinetex C18, 2.6u,150x4.6, 100x4.6, 和50x4.6 来进行比较。由于Kinetex的分离效果和峰型很好,可以使用短柱以减少分析的时间。实验证明使用核壳技术的Kinetex柱是对啤酒生产过程中的啤酒花进行监测和品管是Z理想的色谱柱。