蛋白芯片及技术服务

蛋白芯片及技术服务

 

   蛋白芯片技术是根据蛋白质－蛋白质相互作用规律而设计的高通量蛋白检测技术平台。其主要特点是将已知蛋白阵列固定在支撑物表面，用来检测相配对的未知蛋白，这种新技术使得研究人员可以在一次实验中比较生物样品中成百上千的蛋白质的相对丰度，相对于传统技术而言，效率大为提高。固定在支撑物上的蛋白质可以是抗体、抗原、受体、配体、酶、底物以及蛋白结合因子等。它能从整体水平对蛋白质的功能及表达的状况进行有效地动态监测与深入分析，具有广泛的应用前景。本公司拥有MicroGridⅡ微点阵芯片制作平台、Genepix 4000B芯片扫描仪和分析软件，能够为客户提供抗体芯片、抗原芯片、蛋白标志物和细胞因子芯片进行肿瘤与自身免疫病的诊断。

 

 

基本原理

    蛋白芯片的技术原理由Roger Ekin在上世纪80年代提出：将各种蛋白质有序地固定于玻片或微珠等固相载体上成为检测的芯片，然后，用标记了有特定荧光物质的靶分子与芯片作用，根据蛋白质分子间特异性结合的原理，靶分子将与芯片上相匹配的蛋白质结合，产生的荧光将指示对应的蛋白质及其表达数量。利用荧光扫描仪或激光共聚扫描技术，测定芯片上各点的荧光强度，通过荧光强度分析蛋白质与蛋白之间相互作用的关系，由此达到测定各种基因表达功能的目的。

 

健海主要提供的蛋白芯片服务：健海主要提供的蛋白芯片服务：

 

1. Autoantigen Microarray service(自身抗原芯片服务，芯片价格另计)

价格：请咨询健海客服部，每个订单要求至少8个样品。

使用自身抗原芯片可用于检测血清或者其他体液中的自身抗体，样品与自身抗原芯片孵育，自身抗体与芯片上cy3标记的抗IgG和cy5标记的抗IgM(或者IgA)结合，每个样品要求的Z少血清量5ul。

                                                                   

2. Autoantigen Microarray slide(自身抗原芯片)

价格：芯片价格请咨询健海客服部

自身抗原芯片包括70种自身抗原和6种对照蛋白。自身抗体点阵打印在16-pad FASAT玻片上，每个芯片包括16个同样的阵列，可处理16个样品。

 

3. Protein array printing service(蛋白阵列点样服务)

价格：阵列单价请咨询健海客服部（重复点样，点样斑点少于100种蛋白质）

我们可以将您的样品点样于NC包被的FAST玻片上或者您选定的玻片，蛋白质浓度需要大于1mg/ml, Z少需要15微升。每个订单Z少要求8个阵列。

 

4. Reverse phase protein array printing service(反相蛋白阵列点样服务)

价格：阵列单价请咨询健海客服部（重复点样，点样斑点少于100种蛋白质）

我们可以将您的组织或者细胞裂解液样品点样于NC包被的FAST玻片上或者您选定的玻片，您需要提供384孔板的稀释组织或者细胞裂解液。蛋白质浓度需要大于1mg/ml, Z少需要15微升用于点样。

 

MicroGrid Ⅱ微点阵生物芯片点样仪

    公司拥有Genomic Solutions生产的BioRobotics MicroGrid Ⅱ全自动芯片点样仪，可根据实验需要自主设计制作芯片。

              

主要优点：

1、创新的平台：大容量，小体积。

2、自主设计：易于升级和自主设置，能快速的适应实验的需要。

3、点样量大：专为高通量筛选的芯片设计，可达到10个BioBanks的点样量。

 

 

健海提供蛋白芯片制备服务的主要实验流程如下：

1 固相载体及其处理
载体：载玻片、滤膜、凝胶、滴定板等

2 蛋白质的预处理
选择具有较高纯度和完好生物活性的蛋白进行溶解。

3 点制微阵列
使用MicroGrid Ⅱ微点阵生物芯片点样仪将蛋白有序的点在固相载体上。

4 固定微阵列上的蛋白样点

膜为载体：芯片放入湿盒， 37°C 1h

载玻片为载体：化学修饰产生醛基固定蛋白

5 微阵列的封闭
主要封闭试剂：BSA或Gly

 

GenePix 4000B 激光芯片扫描仪

    我公司采用Molecular Devices出品的Axon GenePix 4000B激光扫描仪对蛋白质芯片进行分析，此仪器为双波长激光同步扫描系统。

 

主要优势：

1、实时监控：可调激光强度、可调焦距、可调的PMT使信噪比ZG。

2、双波长同步扫描：采用非聚焦光路， 双波长同步扫描读取数据。独特的光学路径结构，在五分钟内同时间双波扫描22ⅹ75mm矩阵。

3、分辨率高：双光电倍增管各别收集双荧光资料，使得点与点之间讯号交杂率（crosstalk）小于0.1，且分辨率在 5～100μm范围内可调。

4、灵敏度高：可测£0.1荧光分子/mm²，增大了目标样本的光量收集，并减少吸收散射光所造成的背景值。

5、输出功率稳定：光电倍增管及激光管功率可调整，并利用自动温度控制和自动功率控制反馈回路保持稳定的输出功率。

6、精进的分析软件：设计人性化，图像自动叠加，无误差，自动寻找点（Auto Align），自动形成各项分析测量的Scatter Plot，自动接受从其它扫描仪来的影象。