组织来源:
新鲜
细胞形态:
悬浮
运输方式:
常温/快递
生长状态:
良好
英文名:
SU-DHL-4
数量:
100万
供应商:
上海名劲
品系:
人
规格:
T25
使用方法1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:取出细胞培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入 37℃,5%CO2细胞培养箱中静置 2-3 小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。2、细胞传代:待细胞达到一定密度(不超过 1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。方法①:收集细胞,1000rpm 离心 5min,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀,将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。3、细胞冻存:1)将细胞悬液转移至 15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h 后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。4、细胞复苏:1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;2)将冻存管中的细胞移至含 10ml 完全培养基的 15ml 离心管中, 1000rpm离心 5min;3)弃上清,沉淀用 5ml 完全培养基重悬,接种 25cm2 培养瓶,于 37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。注:悬浮细胞运输中会有少些细胞因为碰撞裂解产生碎片,收到细胞如碎片较多时,胎牛血清可以用 15%培养三天,利于细胞尽快恢复状态,细胞稳定后再调