GS-E40013 | 豚鼠血清总补体(CH50)ELISA试剂盒 | Guinea Pig 50% complement hemolysis,CH50 ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40014 | 豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒 | Guinea Pig Super Oxidase Dimutase,SOD ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40015 | 豚鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒 | guinea pig Histamine,HIS ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40016 | 豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 | guinea pig transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40017 | 豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 | Guinea pig Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40018 | 豚鼠生长激素(GH)ELISA试剂盒 | Guinea pig Growth hormone,GH ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40019 | 豚鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒 | guinea pig Endothelin 1,ET-1 ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40020 | 豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 | guinea pig Immunoglobulin E,IgE ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40021 | 豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒 | guinea pig Immunoglobulin A,IgA ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40022 | 豚鼠基质金属蛋白酶YZ因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 | guinea pig tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40023 | 豚鼠基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒 | guinea pig matrix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40024 | 豚鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 | guinea pig hepatocyte growth factor,HGF ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40025 | 豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 | guinea pig Interferon γ ,IFN-γ ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40026 | 豚鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒 | guinea pig telomerase,TE ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40027 | 豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒 | guinea pig follicle-stimulating hormone,FSH ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40028 | 豚鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒 | guinea pig intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40029 | 豚鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒 | Guinea pig Epidermal growth factor,EGF ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40030 | 豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒 | guinea pig Leukotriene B4,LT-B4 ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40031 | 豚鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒 | guinea pig Interleukin 6,IL-6 ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40032 | 豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)ELISA试剂盒 | Guinea Pig lipid peroxlde,LPO ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40033 | 豚鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)ELISA试剂盒 | Guinea Pig advanced glycation end products,AGEs ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40034 | 豚鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒 | Guinea Pig Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA试剂盒 | 96T/48T | GS-E40035 | 豚鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒 | Guinea Pig monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA试剂盒 | 96T/48T | 豚鼠(Guinea Pig)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)ELISA 检测试剂盒 本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆 试验原理: MCP-1试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知MCP-1浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将MCP-1和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中MCP-1的浓度呈比例关系。 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 | 96/48人份酶标板 | 1块板(96T) | 半块板(48T) | 即用型 | 塑料膜板盖 | 1块 | 半块 | 即用型 | 标准品:800pg/ml | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按说明书进行稀稀 | 空白对照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 | 标准品稀释缓冲液 | 1瓶(5ml) | 1瓶(2.5ml) | 即用型 | 生物素标记的抗MCP-1抗体 | 1瓶(6ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 | 亲和链酶素-HRP | 1瓶(10ml) | 1瓶(5.0ml) | 即用型 | 洗涤缓冲液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) | 按说明书进行稀释 | 底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 | 底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 | 终止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 | 标本稀释液 | 1瓶(12ml) | 1瓶(6.0ml) | 即用型 | 自备材料 1. 蒸馏水。 2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。 3. 振荡器及磁力搅拌器等。 安全性 1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。 2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 操作注意事项 1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。 3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。 5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。 8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。 9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 样品收集、处理及保存方法 1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液 5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 试剂的准备 1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行: 800 pg/ml | (6号标准品) | 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 | 400 pg/ml | (5号标准品) | 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 | 200 pg/ml | (4号标准品) | 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 | 100 pg/ml | (3号标准品) | 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 | 50 pg/ml | (2号标准品) | 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 | 25 pg/ml | (1号标准品) | 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 | 0 pg/ml | (空白对照) | 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 | 2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。 操作步骤 1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。 2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。 3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。 4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。 5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。 6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。 7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。 8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。 9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。 建议使用的实验方案 | 标准品浓度(pg/ml) | | A | 800 | 800 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | B | 400 | 400 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | C | 200 | 200 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | D | 100 | 100 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | E | 50 | 50 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | F | 25 | 25 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | G | 0 | 0 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | H | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 样品 | 局限 6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。 试剂盒性能 1. 灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。 2. 特异性:不与其它细胞因子反应。 3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。 结果 判 断 与分析 1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值 2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的MCP-1标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的MCP-1含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。 3、检测值范围:0-800pg/ml 4、敏感度: 1.0 pg/ml |