MMLV反转录酶

Purified from an E.coli strain expressing a recombinant enzyme
概述


用于cDNA合成的野生型鼠白血病病毒反转录酶M-MLV具有以下几种活性：依赖于RNA的DNA聚合酶活性；依赖于DNA的DNA聚合酶活性；降解DNA/RNA杂合体中模板RNA的RNase H活性。
本酶 M-MLV (RNase H-)是通过点突变使RNase H活性缺失的，因此它所具有的DNA聚合酶的活性与野生型的相同。同时，本酶与通过Deletion操作而使RNase H活性丧失的 M-MLV (RNase H-) 相比，其延伸能力有显著提高，因此可适用于较长cDNA的调制以及制作高比例的全长cDNA文库。
活性定义


以Poly (rA)・Oligo (dT) 为模板/引物，在37℃、10分钟的条件下，掺入1 nmol的[3H] dTMP 所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。
纯度

200 U的本酶和1 �g的� DNA-Hind III分解物在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
200 U的本酶和1 �g的Supercoiled pBR 322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
200 U的本酶和1 �g的16S, 23S rRNA在37℃下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

1st-Strand cDNA合成。
cDNA Probe调制。
RT-PCR。