人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

常见问题
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人游离睾酮(F-TESTO)试剂盒水平。用纯化的人游离睾酮(F-TESTO)试剂盒抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入游离睾酮(F-TESTO)试剂盒，再与HRP标记的游离睾酮(F-TESTO)试剂盒抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的游离睾酮(F-TESTO)试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人游离睾酮(F-TESTO)试剂盒浓度。人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

 操作流程

    中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL),又名脂质运载蛋白-2(lipocalin-2,Lcn-2)、蛋白酶-3(proteinase-3)或噬铁蛋白(siderocalin),是过去几年中对世界医学有很大贡献的脂质运载家族的成员之一,由Kjeldsen等在1993年研究人类中性粒细胞内92 000明胶酶,即基质金属蛋白酶9人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

 代测服务

    中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）在国际上已成为临床诊断急性肾损伤（AKI）的主要生物标志物。该课题主要研制抗人NGAL单抗及探讨其国产化诊断试剂的初步应用。方法预测NGAL抗原表位并结合NGAL的晶体结构,设计合成抗原表位肽并与血蓝蛋白偶联,免疫小鼠制备抗NGAL单抗;人工合成NGAL基因构建原核表达载体p ET-Dsb A-NGAL,诱导表达后分离纯化重组NGAL蛋白,研制NGAL标准品;建立双单抗体夹心ELISA法,检测该方法的线性范围、检测限、灵敏度和精密度,同时检测20份健康对照组和20份AKI患者血清和尿液样品。结果针对NGAL两个表位（21-34aa;58-71aa）分别获得了4株和3株能够稳定分泌抗NGAL单抗的细胞株;ELISA法检出限为0.25 ng/ml,标准曲线在2.5-125.0 ng/ml范围内线性良好,批间变异CV值均小于10%;冻干NGAL标准品在4℃稳定达6个月;AKI组血清和尿液中NGAL含量分别为（589.5±75.5）和（89.4±12.4）ng/ml,而健康对照组血清和尿液中NGAL含量分别为（58.8±9.5）和（7.2±1.4）ng/ml;两组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论该研究获得了抗人NGAL单抗及其基因工程NGAL标准品并建立了ELISA定量检测试剂,为实现NGAL临床免疫检测诊断试剂的国产化提供了良好的技术基础。人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

 适用范围

    研究脓毒性休克患者并发急性肺损伤(acute lung injury, ALI)时肺泡灌洗液中人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin，NGAL)含量与血管外肺水指数(extravascular lung water index, EVLWI)之间是否存在相关性。方法前瞻性收集天津市ZX医院ICU科2013年12月至2015年6月110例脓毒性休克患者，依据指南6 h内完成初始的液体复苏，按是否并发ALI分为两组：非ALI组为A组(n＝61)，ALI组为B组(n＝49)。收集两组患者入住重症监护室(ICU)时的基线指标，经肺热稀释技术和脉搏波型轮廓分析技术(PICCO)监测两组患者血流动力学指标及EVLWI，完成初始补液后床旁纤维支气管镜检查留取肺泡灌洗液酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测NGAL含量，并同时记录EVLWI值。结果两组患者基线水平统计差异无统计学意义(P>0.05)。对影响脓毒性休克患者EVLWIZG的危险因素：液体平衡量、NGAL、心脏指数(CI)、全心舒张末期容量指数(GEDI)、人血白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)等进行多元线性回归分析，结果EVLWI与NGAL、GEDI存在直线回归关系。回归方程依次为：Y(NGAL)＝2.017＋0.035X与Y(GEDI)＝－0.671＋0.004X。进一步行相关分析：EVLWI与NGAL之间的r＝0.835，P<0.01；EVLWI与GEDI之间的r＝0.504，P<0.01；NGAL与GE。人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

 注意事项

       对入源中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)进行原核表达、纯化,并验证其免疫学活性.方法 通过化学合成法合成人源NGAL成熟肽cDNA序列,构建原核表达载体pCold-NGAL,转化至E.coli BL21(DE3) plysS中.摸索pCold-NGAL诱导条件,表达并纯化重组蛋白;使用SDS-PAGE、Western blot法和免疫比浊法鉴定纯化后的重组NGAL蛋白的相对分子质量(Mr)和以及与NGAL单克隆抗体(mAb)的结合活性.结果 经双酶切和测序验证,原核表达载体pCold-NGAL成功构建.优化诱导条件后,重组NGAL蛋白在E.coli BL21(DE3) plysS中以可溶性蛋白形式表达,Mr约为25 000.通过Ni2+亲和层析纯化获得高纯度重组NGAL蛋白,SDS-PAGE分析其纯度高于98.0％.经Western blot法和免疫比浊法鉴定,重组NGAL蛋白可与NGALmAb特异性结合.结论 成功表达和纯化了重组NGAL蛋白,并具有免疫学活性。人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

 储存方式

       血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)检测在急性肾功能损伤（AKI)早期诊断中的意义。收集无慢性肾病的重症监护病房（ICU)、冠心病监护病房（CCU)患者60例，分别在其术前及术后6、12、48 h采集血样，其中27例发生AKI(AKI组)，以其余33例未发生AKI(无AKI组)。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清NGAL浓度，碱性法检测血清肌酐（SCr）浓度，胶乳增强免疫浊度法检测血清半胱氨酸蛋白酶YZ剂C(Cys C)浓度。以48 h内SCr高于基础水平50%作为AKI的诊断标准，应用受试者工作特征（ROC)曲线评估NGAL在AKI早期诊断中的效力。与术前比较，AKI组术后6、12、48 h的血清NGAL明显升高，Cys C在术后12、48 h明显升高，而SCr在术后48 h才显著升高。无AKI组术前与术后6、12、48 h的NGAL、SCr、Cys C浓度差异无统计学意义(P>0.05)。术后6、12、48 h血清NGAL的ROC曲线下面积为0.51［95%可信区间(CI): 0.25～0.78］、0.80(95%CI: 0.58～0.95)、0.85(95%CI： 0.61～0.99)。血清NGAL在术后6 h上升，术后12 h即能较好地预测AKI，其预测AKI时间早于Cys C和SCr。血清NGAL可能在AKI早期诊断中有良好的应用价值。人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

 产品用途

      肺癌患者血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的水平变化及意义.方法:应用酶联免疫吸附法(EHSA)测定112例肺癌患者(肺癌组)与112例健康成年人(对照组)的血清NGAL水平.结果:肺癌组血清NGAL水平高于对照组(P＜0.05);不同部位、病理类型及临床分期的肺癌患者血清NGAL水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05);不同分化程度及有无远处转移的肺癌患者血清NGAL水平比较差异具有显著性(P＜0.05);多因素回归分析显示,血清NGAL与肺癌(OR=2.942,P=0.021)及肺癌远处转移(OR=5.603,P=0.035)有关.结论:血清NGAL是肺癌的危险因子,且与肺癌的侵袭性及远处转移有关。人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

 品质保证

         测健康人群血浆中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白( neutrophil gelatinase associated lipocalin,NGAL)表达水平,探讨临床诊断中的正常参考值。方法:入组约1000名健康实验者(年龄>18岁,血清肌酐、尿素氮正常范围,尿蛋白阴性),按照实验者不同年龄段分为四组(A组:18-35岁291例,B组:35-55岁251例,C组:56-65岁258例,D组:>65岁375例),通过双抗体夹心酶联免疫吸附法测定血清NGAL浓度,取95%的可信区间为该标记物的血浆正常表达水平;对比不同年龄段及不同性别间血清NGAL表达水平差异。结果:A组95%可信区间为(85.46-85.95)ng/ml,B组95%可信区间为(82.78-83.30)ng/ml,C组95%可信区间为(98.55-99.17)ng/ml,D组95%可信区间为(126.41-127.49)ng/ml。A、B、C三组与D组之间比较P值均<0.0001,A、B、C三组间比较P>0.05,其中A组男女之间相比P<0.0001,其他组男女之间比较P>0.05。结论:不同年龄段血清NGAL值的参考范围不同,老年组(年龄>65岁)的血浆NGAL值与其他年龄组血清NGAL值相比存在显著性差异(P<0.0001),提示人群中血浆NGAL值的表达除了受疾病的影响之外,还与年龄相关,但在不同性别之间无明显差异性表达。人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

 应用案例

   聚精汤是全国中医男科专家徐福松教授创制的ZL男性不育症的经验方。临床用于ZL男性不育症能 明显提高精子浓度，改善弱精子症患者精子活力。目前关于聚精汤ZL弱精子症的作用机制研究较少，本课题通过观察聚精汤对奥硝唑所致的成年雄性大鼠弱精子症 模型的治LX果，探讨聚精汤在ZL弱精子症中的作用机制。 　　方法：将24只SD雄性大鼠随机分为3组，每组8只。A组（对照组）：1％CMC- Na10ml/kg/d，B组（奥硝唑模型组）：奥硝唑悬液400mg/kg/d，C组（中药ZL组）：聚精汤溶液19g/kg/d+奥硝唑悬液 400mg/kg/d,连续灌胃给药20d。末次给药24h后将所有大鼠处死，分别取出每只大鼠附睾尾部组织，将其中一侧附睾尾部组织迅速放入10%中性 液中，待做病理检查。另一侧附睾尾部组织浸泡于2ml生理盐水中，30℃温箱中剪碎，制精子悬液，取10μl样本用北京伟力彩色精子质量检测系统 检测精子密度及精子活率。将剩余样本3000r/min离心15min，稀释后，取10μl上清样品用大鼠总肉毒碱(TC)Elisa试剂盒进行显色反 应，用酶标仪检测吸光度，然后计算出样品肉毒碱浓度。 　　结果：A组和C组大鼠附睾尾部肉毒碱浓度均高于B组，有显著性差异 (P0.05)；A组和C组大鼠附睾尾部精子活率均高于B组，有显著性差 异(P0.05)。A组大鼠附睾输出小管和附睾。人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

常见问题 

健康成年人血浆肉毒碱水平及日尿肉毒碱排出量,为研究疾病状态下肉毒碱代谢改变提供参考依据.方法给予40名健康成年人(男、女各20名)标准饮食,用GX液相色谱法测定其空腹血浆总肉毒碱(TC)、游离肉毒碱(FC)和乙酰肉毒碱(AC)水平及日尿TC、FC和AC排出量.结果血浆和尿液肉毒碱测定的变异系数在9.1%以下,偏差不超过5.6%,标准曲线的相关强度r2≥0.999.给予健康成年人标准饮食后,男性血浆TC、FC和AC水平[(53.1±8.5)、(41.2±6.1)、(6.2±0.6)μmol/L]高于女性[(45.4±5.6)、(35.2±4.9)、(5.7±0.7)μmol/L](P=0.002、0.002、0.035);男性日尿TC、FC和AC排出量[(386.1±22.9)、(180.5±31.8)、(33.8±3.3)μmol]高于女性[(240.1±35.6)、(112.7±22.6)、(29.3±4.3)μmol](P＜0.0005、＜0.0005、＜0.0005).空腹血浆TC、FC和AC水平及日尿TC、FC和AC排出量均与机体瘦体重有关(r=0.501～0.856).男性血浆(TC-FC)/FC比值为0.29±0.05,女性为0.29±0.04.结论以GX液相色谱法测定血浆肉毒碱水平和日尿肉毒碱排出量,其重复性好,回收率高.给予健康成年人标准饮食后,空腹血浆肉毒碱水平和日尿肉毒碱排出量均与机体瘦体重呈正相关.人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

 操作流程

         观察血液透析和腹膜透析患者血浆总肉毒碱（TC）和游离肉毒碱（FC）的水平。方法200名正常对照组标本来自本院健康体检人群，受检病例为本院肾脏内科患者；TC和FC采用循环酶法测定，在日立7170全自动生化分析仪上测定。结果200名正常对照组TC（56．52±9．61）μmol／L，FC（46．60±8．23）μmol／L；37例血液透析患者透析前TC（41．47±13．22）μmol／L，FC（24．58±8．91）μmol／L；与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）；118例腹膜透析患者TC（40．59±9．94）μmol／L，FC（25．52±7．45）μmol／L；与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。血透患者透析后TC（14．62±5．32）μmol／L，比透析前下降（64．70±5．95）％，FC（8．62±3．01）μmol／L，比透析前下降（63．84±9．14）％，且TC与FC的水平与透析程呈负相关（r=-0．68，-0．73）；118例腹膜透析患者TC与FC的水平与透程无关（P〉0．05）。11例血液透析患者静脉给予左旋卡尼汀1g，透析后TC（70．31±36．18）μmol／L，FC（35．53±19．25）μmol／L，与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论血液透析和腹膜透析患者普遍存在肉毒碱缺乏，血液透析患者随着透析程的延长，缺乏越严重。人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

 代测服务

       左旋肉毒碱（L-carnitine，L-C）对人成骨细胞增殖和凋亡的作用。方法以^3H掺人法（^3H—TdR）测定左旋肉毒碱对人成骨细胞增殖的影响；以吖啶橙，溴化乙啶染色和细胞凋亡ELISA（酶联免疫吸附法）试剂盒测定左旋肉毒碱对人成骨细胞凋亡的影响；以免疫印记法检测左旋肉毒碱干预前后活化型Caspase-3、-9蛋白质表达水平的改变。结果10～100mmol／L左旋肉毒碱能促进人成骨细胞增殖。吖啶橙，溴乙啶染色法示100mmol／L左旋肉毒碱干预使人成骨细胞凋亡细胞明显减少。ELISA结果示10～100mmol／L左旋肉毒碱干预可显著YZ人成骨细胞凋亡。10～100mmol／L左旋肉毒碱干预可YZ无血清饥饿诱导的人成骨细胞caspase-3、9活化增加。结论左旋肉毒碱促进人成骨细胞增殖，并通过下调Caspase-3、-9的活化YZ人成骨细胞凋亡。人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒

 主要优点

         This study was designed to evaluate the ELISA for diagnosis of American visceral leishmaniasis (AVL) using antigen prepared from different Leishmania isolates ａnd from a strain of Trypanosoma cruzi. Two Leishmania donovani chagasi isolates from Bahia ａnd Maranhão (both states of northern Brazil), one L. donovani from Sudan, one L. mexicana amazonensis isolate, ａnd one T. cruzi isolate were used. A total of 375 sera were tested, including 119 from AVL patients, 96 from nonleishmaniasis hospitalized patients, 20 from healthy persons, 30 from patients with mucocutaneous leishmaniasis, 28 from patients with Chagas＇ disease, 20 from patients with tuberculosis, 21 from leprosy patients, 27 from schistosomiasis patients ａnd 14 from patients with systemic mycoses. The antigens prepared from L. d. chagasi (Bahia) ａnd L. m. amazonensis showed the highest sensitivity (98% ａnd 99%, respectively) for detecting antibodies in sera from AVL patients. However, the specificity of L. d. chagasi (Bahia) antigen was better than that of L. m. amazonensis (96% vs. 86%). Comparison among the three L. Donov

 储存方式

      现代流行病学调查结果显示,适当增加主食中全谷物的摄入比例对预防高脂血症、心脑血管疾病、动脉粥样硬化、糖尿病等慢性疾病具有重要作用。与精谷物相比,全谷物因为保留了其糠层而富含维生素、膳食纤维等营养成分和酚类等植物活性物质。与水果蔬菜相比,全谷物中酚类等植物活性物质的健康效应长期被低估。为此本研究以全谷物糙米为代表,以米糠为研究原料,通过大孔吸附树脂优化建立米糠酚类物质的分离纯化条件,探讨全谷物糙米酚类物质对高脂血症小鼠脂质代谢的调节作用,通过分析小鼠肝脏脂质代谢相关基因表达水平变化,探究其调节脂质代谢分子机制。研究结果对揭示全谷物糙米的健康效应机制,引导全谷物膳食消费具有重要意义。具体研究内容和结果如下:(1)全谷物糙米酚类物质大孔树脂纯化工艺优化:比较9种不同极性大孔树脂对全谷物糙米酚类物质提取物(BRPE)中总酚的静态吸附和解吸性能,优化其大孔树脂对BRPE的吸附和解吸工艺参数;比较大孔树脂纯化前后提取物中总酚、总黄酮、总糖、蛋白、脂肪、灰分和水分含量的变化;采用HPLC结合应用酚类标准品分析BRPE经大孔树脂纯化前后其各单体酚类物质种类与含量,并通过氧自由基吸收能力(ORAC)和细胞抗氧化(CAA)分析方法比较其纯化前后的抗氧化活性。结果显示,HPD-300型大孔吸附树脂对BRPE总酚静态吸附和解吸效果。人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒
 

工作原理 

有氧运动可能通过调节机体脂代谢来有效地降低体重、体脂。有研究表明microRNA(miRNA)通过与靶基因3＇非翻译区互补结合,调节机体脂代谢。本文通过研究有氧运动对饮食诱导肥胖大鼠肝脏miRNA表达及脂代谢的调节作用,旨在探寻在有氧运动中参与肝脏脂代谢调节的重要miRNA,探讨其调节脂代谢的可能机制。方法:1.建立肥胖大鼠模型。利用60只21天龄离乳雄性SpragueDawley(SD)大鼠,适应性喂养1周后随机分为两组,正常饮食组10只,高脂饮食组50只,12周后从高脂饮食组挑选体重大于正常组平均体重的大鼠作为肥胖组。肥胖组大鼠比正常组大鼠Lee＇s指数、脂肪重、脂体比显著升高(P0.05)。2.训练安排。肥胖组大鼠继续高脂饮食喂养,2周水平跑台适应性训练后(在2周内,训练速度从16m/min逐渐递增到25m/min,运动时间从20min/d逐渐递增到60min/d),选取体重、运动能力基本一致的20只大鼠随机分为2组:安静组和训练组,每组10只。训练组用水平跑台进行耐力训练,训练强度为25m/min,持续运动1h/d、6d/w、共4w。3.取材。取材前大鼠禁食禁水12h,称重、腹腔注射10%水合三氯乙醛溶液(0.3ml/100g体重),测量体长,计算Lee＇s指数;取肝右叶液氮速冻,-80℃保存待测;取肾周和附睾脂肪称重,计算脂体比。4.肝脏miRNA表达。利用miRNA芯片检测肝脏722条成熟miRNA的表达水平。人总肉毒碱(TC)elisa试剂盒