RT-SK005通用性DAB 染色试剂盒180人份现货供应

【预期用途】

本司生产的 DAB 染色试剂盒（链霉卵白素-生物素法）适用于检测小鼠或兔源性一抗，对常规经固定的石蜡切片、冷冻切片及细胞涂片、爬片中的靶抗原进行检测，适用于生物显微镜下观察。

RT-SK005通用性DAB 染色试剂盒180人份现货供应
【检验原理】

RT-SK005通用性DAB 染色试剂盒180人份现货供应
【检验方法】

1 检验所需仪器、设备

 移液器、免疫组化油笔、干燥箱、计时器、孵育盒、染色架、盖玻片、生物显微镜、洗瓶

2 溶液配置

DAB显色液：DAB显色液需要在使用前配制。配制方法：在配备的小试管中依次滴加稳定型DAB缓冲液1ml，稳定型DAB底物50-100μl，稳定型DAB色原50-100μl，以配制DAB显 色液。配置好的DAB显色液避光存放，24小时内有效。

3 试验温度条件：18-28℃

4 试验步骤

a) 脱蜡和水化

石蜡切片置于新鲜的二甲苯中，浸泡10分钟×2次，

除去多余的液体后，置无水乙醇中，浸泡5分钟×2次；

除去多余的液体后，置95%乙醇中，浸泡2分钟；

除去多余的液体后，置85%乙醇中，浸泡2分钟；

自来水冲洗1分钟； PBS溶液冲洗1分钟。

b) 抗原修复：参照一抗说明书进行。

c）阻断内源性过氧化物酶

将抗原修复后的切片用自来水冲洗1分钟，用油笔圈定玻片上的待测组织区域，PBS溶液冲洗1分钟×1次。 除去PBS溶液，在油笔圈定的区域内加100μl内源性过氧化物酶阻断剂，室温下孵育10分钟； PBS溶液冲洗1分钟×3次。

d) 加非特异染色阻断剂

除去PBS溶液，加100μl非特异染色阻断剂，室温下孵育10分钟。

e) 加抗体

除去非特异染色阻断剂，加100μl一抗，室温下孵育60分钟。 PBS溶液冲洗3分钟×3次。

f) 加酶标羊抗小鼠/兔IgG聚合物

除去PBS溶液，加100μl酶标羊抗小鼠/兔IgG聚合物，室温下孵育15分钟。 PBS溶液冲洗3分钟×3次。

g) 显色

除去PBS溶液，加100-200μl新鲜配制的DAB显色液，室温下孵育3-5分钟。

h) 复染

自来水冲洗，加100-200μl苏木素体细胞染色液（我司产品：RT-S003）孵育10-30秒，或自行配制的苏木素染色至细胞核浅蓝色； PBS溶液或自来水冲洗返蓝。

i) 脱水、透明、封片

置85%乙醇中，浸泡3分钟； 置95%乙醇中，浸泡3分钟； 置无水乙醇中，浸泡3分钟； 二甲苯透明；中性树胶和盖玻片封片

j）生物显微镜阅片

5 结果判断