Anti-GRAMD3抗体,丙型肝炎病毒-NS3反转录激活蛋白2抗体,用于WB、FITC、IHC-P、IHC-F、IF、Elisa等,欢迎来电咨询订购,公司竭诚为您提供优质的售前售后服务!
Anti-GRAMD3抗体,丙型肝炎病毒-NS3反转录激活蛋白2抗体抗体种属:兔多抗,小鼠单抗
浓度:1mg/ml。
抗体的相关标记:
HRP,Biotin,Gold,RBITC,AP,FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7,PE,PE-Cy3,PE-Cy5,PE-Cy5.5,PE-Cy7,APC,Alexa Fluor 350,Alexa Fluor 488,Alexa Fluor 555,
Alexa Fluor 647
Anti-GRAMD3抗体,丙型肝炎病毒-NS3反转录激活蛋白2抗体交叉反应:human,rat,mouse,pig,dog
应用:可以用于做石蜡切片免疫组化,冰冻切片免疫组化,Elisa,WB,免疫荧光等实验。(公司备有抗体及以下抗体做免疫组化与WB所需的二抗)
稀释:
1、Western Blotting (starting dilution 1:200, dilution range1:100-1:1000)
2、Immunoprecipitation [1-2 μg per 100-500 μg of total protein(1 ml ofcell lysate)]
3、Immunofluorescence (starting dilution 1:50, dilution range 1:50-1:500)
4、ELISA (starting dilution 1:30, dilution range 1:30-1:3000)
5、Immunohistochemistry(including paraffin-embedded sections) (starting dilution 1:50 dilution range 1:50-1:500)
Anti-GRAMD3抗体,丙型肝炎病毒-NS3反转录激活蛋白2抗体<>
要获得漂亮的Western Blot结果,离不开一株质量优异的抗体。抗体选择有很多需要注意的地方,选择单抗还是多抗,什么种属的,用不用考虑免疫原,价格如何等等。这些在其他地方已经有过比较多的讨论,这里提出这个问题,主要想强调两个经常被忽视的因素:
1. 灵敏度/检测限
“灵敏度”Z初是一个统计学概念,表示样本中检测结果阳性数占所有阳性样品的比例。扩展到各个领域当中就成为各种机器或方法的性能指标,灵敏度越高,越能反应测定值的实际情况。在Western Blot试验中,如果要量化抗体检测的灵敏度就需要一个参数——抗体检测限。抗体检测限越低,说明会有越少的待测抗原被漏检。因此,对于定性或半定量的Western Blot试验而言,抗体检测限是一个重要指标,抗体检测限低的抗体效能高,使用这样的抗体可以获得更真实的实验结果。所以,选购抗体用作WB实验,在可能的情况下要选择检测限更低的抗体。
2. 注意1抗体,阿米洛利结合蛋白1抗体,用于WB、FITC、IHC-P、IHC-F、IF、Elisa浓度
抗体浓度对于商品化抗体的影响有两方面。首先,较高浓度的抗体(>0.5mg/mL)通常性质更稳定,受生产工艺和成本控制等因素影响,不同品Pai的抗体的浓度也不相同,所以购买时应注意比较;另外,经验不足的实验者往往被抗体的体积迷惑,然而相同质量下,低浓度的抗体体积更大(例如有的经销商会对抗体进行恶意稀释再转售),所以,计算抗体性价比的时候应该考虑的因素是抗体的质量而非体积。
孵育一抗
A. 先将需要检测的抗体准备好,并决定好它们的稀释度。
B. 配好5%的Milk(TBST溶解),按要求稀释好抗体。注意,如需高比例稀释,
Z好采用梯度稀释。
C. 将稀释好的抗体和膜一起孵育。 一般采用RT 1小时,可根据抗体量和膜上
抗原量适当延长或缩短时间。
注意:为了便于后面分析结果,我们一般会选用已确定分子量大小而且纯度高的抗体作为marker与一抗同时孵育。
洗涤
用 TBST先快速洗三次,把milk尽快的wash掉。然后5mins *5。
洗涤是为了洗去一抗与抗原的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。
孵育二抗
孵育 RT1 小时。 一般采用HRP标记的二抗,稀释比例为1:5000。二抗的稀释比例不能太低,否则容易导致非特异性的结合。注意二抗的选择有多种,要根据一抗来选择抗兔、抗鼠或者抗羊的二抗,以及根据后面的显色条件来选择HRP、AP或者GOD(葡萄糖氧化酶)酶链的二抗或者标志其他探针(如核素等)的。
洗涤:用TBST先快速洗三次,把milk尽快的wash掉。 然后5mins *5。
洗涤是为了洗去二抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅,所以洗涤一定要干净。
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