色谱柱的使用注意事项 色谱柱的使用注意事项

色谱柱的使用注意事项

1、在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要使用的流动相是否互溶。在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。

2、 流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水是超纯水。所配的流动相须经过0.45μm的滤膜过滤，尤其是含盐的流动相。另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。

3、以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0，BDS C18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0-10.0。当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。

4、使用流动相溶解样品。使用予处理方法，除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。

5、对于被污染的色谱柱可以用水→甲醇→二氯甲烷→甲醇→水冲洗来再生，一般每种溶剂冲3～5倍柱体积。

6、从分析柱放大到制备柱，色谱柱的流速、样品载量与其内径之比的平方成正比。