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RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit (50)厂家性能
RNeasy Fibrous Tissue Kits适用于从纤维丰富组织中提取RNA,RNeasy Fibrous Tissue操作流程能简单有效的提取高品质总RNA(参见High-quality RNA from fiber-rich tissues),纯化的RNA适用于多种下游应用,包括芯片分析和real-time RT-PCR (参见 Real-time gene expression analysis in a variety of fibrous tissues 和LightCycler analysis of high-quality RNA from heart)。与其他硅胶方法相比,RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit从纤维丰富组织中提取的RNA产量更高(参见下表)。
与其他硅胶方法相比使用RNeasy Fibrous Tissue Kits具有的RNA产量
大鼠组织(10 mg)使用RNeasy Fibrous
Tissue Mini Kit 得到的RNA产量* (µg)使用硅胶试剂盒得到的RNA产量*(µg)(供应商AV)使用硅胶试剂盒得到的RNA产量*(µg)(供应商R)使用硅胶试剂盒得到的RNA产量*(µg)(供应商S)
心脏8.23.5<0.52.5
肌肉5.30.52.0†2.2
皮肤6.0未确定未确定未确定
食道13.9未确定未确定未确定
* 根据试剂盒供应商的说明书从组织中纯化的RNA。† 离心柱被阻塞,产生低品质RNA。制备样本中的污染 物可能导致产量被高估。
原理
RNeasy技术具有异硫氰酸胍裂解的严谨性以及硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA的纯化流程。RNeasy Fibrous Tissue Kits适用于处理纤维丰富的组织,例如骨骼肌、心脏和主动脉。因为含有大量的收缩性蛋白、连接组织和胶原蛋白,这些组织非常难裂解。RNeasy Fibrous Tissue操作流程将蛋白酶K和RNase-free DNase消化步骤结合起来,在RNA分离的同时能降解蛋白和基因组DNA,纯化得到的高品质总RNA的产量更高。RNeasy技术适用于大于200 nt的RNA,因此RNA产物不包括5S rRNA、tRNA或其他小分子量RNAs,产物占细胞内总RNA的15–20%。