牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)ELISA检测试剂盒说明书

上海岚派优惠供应牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)ELISA检测试剂盒说明书，并提供试剂盒价格、用途、规格、实验原理、说明书、相关实验操作等详细信息。岚派牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)ELISA检测试剂盒说明书等各种ELISA试剂盒均采用的是定量夹心酶联免疫技术。抗体具体为FGF6已经被预先涂到微孔板。标准和样品吸入井和任何FGF6目前被绑定的固定化抗体。生物素共轭的抗体特异性FGF6除去任何未结合的物质后，加入到孔中。抗生物素蛋白共轭的辣根过氧化物酶（HRP）的洗涤后，加入到孔中。经过洗涤，以除去任何未结合的抗生物素蛋白的酶试剂，底物溶液加入到孔中，显色成比例的量的初始步骤中的约束的FGF6。彩色显影被停止并测量的颜色的强度。

   此种方法ELISA试剂盒，具有较高的灵敏度和特异性好，检测鼠标FGF6。观察鼠标FGF6和类似物之间无显著交叉反应或干扰。

【操作流程】

　1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

　　2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

　　3.  待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；

　　4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

　　5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

　　6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

【测试报告】

　　绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

【性能特点】

　　1.  准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

　　2.  灵敏度：检测浓度小于1.0 ng/L。

　　3.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

　　4.  重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

　　5.  贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

　　6.  有效期：6个月

【ELISA试剂盒组成部分】

【注意事项】

　　⑴ 严格按照牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)ELISA检测试剂盒说明书说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30～60min。

　　⑵ 加样后及时放人孵箱。标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。

　　(3)封板温育时，各孔一定要封严，防止阳性标本的液体蒸发，产生周边现象从而导致“花板”的出现。

　　(4)用洗板机洗板时，保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干：还要防止针口有纤维蛋白或异物，这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。

　　(5)合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。

　　(6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

　(7)显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。

　(8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。

    (9)应保证C清洁，整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。

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