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中文名称/Chinese Name:人弹性蛋白(ELN)Elisa试剂盒
英文名称/English Name: ELN (Elastin) ELISA Kit
种属/Organism:人
指标名称/Other Names:ELN
检测方法/Method:Sandwich-ELISA/双抗体夹心ELISA
检测范围/Detection Range:0.16-10 ng/ml
灵敏度/Sensitivit:0.09 ng/ml
检测样品/Sample Type:Serum, Plasma, Other biological fluids/血清、血浆等其它生物样品
人弹性蛋白(ELN)ELISA试剂盒 说明书,人ELN 检测试剂盒 价格 检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠ELN抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的ELN会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠ELN抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠ELN抗体与结合在包被抗体上的小鼠弹性蛋白(ELA)酶联免疫吸附测定试剂盒小鼠弹性蛋白(ELA)酶联免疫吸附测定试剂盒结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠弹性蛋白(ELA)酶联免疫吸附测定试剂盒浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中小鼠弹性蛋白(ELA)酶联免疫吸附测定试剂盒的浓度。
人弹性蛋白(ELN)ELISA试剂盒 说明书,人ELN 检测试剂盒 价格 试剂盒组成
人弹性蛋白(ELN)ELISA试剂盒 说明书,人ELN 检测试剂盒 价格 标本收集:
血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
血浆:
抗凝剂推荐使用EDTA,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂标本。其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃/-80℃电冰箱内,避免反复冻融,6个月内进行检测,4℃保存的应在1周内进行检测。 如果样本中检测物浓度高于标准品值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。
人弹性蛋白(ELN)ELISA试剂盒 说明书,人ELN 检测试剂盒 价格 试验所需自备物品:
酶标仪(450nm波长滤光片)高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水
人弹性蛋白(ELN)ELISA试剂盒 说明书,人ELN 检测试剂盒 价格 操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人弹性蛋白(ELN)ELISA试剂盒 说明书,人ELN 检测试剂盒 价格 计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
人弹性蛋白(ELN)ELISA试剂盒 说明书,人ELN 检测试剂盒 价格 注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
人弹性蛋白(ELN)ELISA试剂盒 说明书,人ELN 检测试剂盒 价格 保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6 个月