透析是小分子可通过半透膜从高浓度一侧扩散到低浓度一侧直至膜两侧浓度达到平衡的简单扩散过程。由于多孔膜有选择性地允许小分子通过,而保留大分子,所以透析可以根据溶质大小起到分离作用。可通过调控透析条件使透析应用得到理想的结果。截留分子量(MWCO)取决于具体的应用。
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透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。
进口美国联合碳化透析带MD10MM 直径6MM 分子量3000北京现货规格齐全 透析膜可用动物膜和玻璃纸等,但用的Z多的还是用纤维素(再生纤维素RC、纤维素酯CE、PVDF等)制成的透析膜,目前常用的是美国Union Carbide (联合碳化物公司,北京冬歌生物科技有限公司是华东区特约经销商)生产的各种尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋内的生物大分子的Z小分子量,缩写为MwCO)大概有100、500、1000、2000、3500、8000、10000、15000、20000、25000、50000、100000、250000、500000、1000000等种类,单位为道尔顿(D)。
商品透析袋制成管状,其扁平宽度为10 mm~77 mm不等。为防干裂,出厂时都用10%的甘油处理过,并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其它生物活性物质有害,用前必须除去。
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1.将透析管剪成适当长度(10-20cm)的小段,即成透析袋。
2.在大体积的2%(m/v)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH=8)中将透析袋煮沸10min。
3.将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。
4.将透析袋置1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min。
5.透析袋冷却后存放于4度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
注:从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。
6.在使用之前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
注:也可以将透析袋放在广口瓶中充满水,松动瓶盖,于20psi(1.40kg/cm2)高压灭菌10min,代替第四步用1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min的操作。
使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中,若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。
新透析袋如不作如上的特殊处理,则可用沸水煮五至十分钟,再用蒸馏水洗净,即可使用。
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