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人5-HIAA检测试剂盒,人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)elisa试剂盒 厂家
特惠产品,现货供应:人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒说明书
英文名称:Human 5-hydroxyindolacetic acid,5-HIAA ELISA试剂盒
试剂盒保存:2-8℃(频繁使用时);-20℃(较长时间不用时)。
性状:试剂盒kit(含试剂+酶联板+覆膜等)
规格:48T/96T,可以提供定量和定性。
注意要点:请仔细阅读产品的详细使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果.
人5-HIAA检测试剂盒,人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒 厂家 实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
人5-HIAA检测试剂盒,人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒 厂家 试剂盒组成
人5-HIAA检测试剂盒,人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒 厂家 标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人5-HIAA检测试剂盒,人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA试剂盒 厂家 操作方法:
一、双抗体夹心法
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
二、间接法
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;
2.次日洗涤3次;
3.加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;
4.(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml;
5.37℃孵育35-60分钟,洗涤;
6.’一遍用DDW洗涤。
其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
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