免费代测 人HNE 检测试剂盒,人4-羟基壬烯酸(HNE)ELISA试剂盒 厂家

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本试剂盒仅供研究使用。
使用目的：
本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中待测物质的含量。
 免费代测 人HNE 检测试剂盒,人4-羟基壬烯酸（HNE）ELISA试剂盒 厂家  实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
 免费代测 人HNE 检测试剂盒,人4-羟基壬烯酸（HNE）ELISA试剂盒 厂家  试剂盒组成

 免费代测 人HNE 检测试剂盒,人4-羟基壬烯酸（HNE）ELISA试剂盒 厂家  标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

 免费代测 人HNE 检测试剂盒,人4-羟基壬烯酸（HNE）ELISA试剂盒 厂家 样品稀释：

48孔配置（3 ml×1瓶）  96孔配置（6 ml×1瓶） 2-8℃保存

 免费代测 人HNE 检测试剂盒,人4-羟基壬烯酸（HNE）ELISA试剂盒 厂家 操作步骤
1.标准品的稀释：准备小试管6只，依次编好号码，先在各小试管中加入标准品稀释液100ul，然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中，充分混匀;再在该试管中取100ul加入第二支试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第三只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第四只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第五只试管中，充分混匀；然后在该试管中取100ul，弃掉。第六只试管作为0号标准品。稀释后各管浓度分别是：320 pg/ml,160 pg/ml,80 pg/ml,40 pg/ml,20pg/ml,0 pg/ml。
在酶标包被板上设标准品孔，依次加入不同浓度的标准品50ul（建议每个浓度做2个平行孔）。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品、酶标试剂及生物素标记的抗IL-6抗体，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品40μl，然后再加生物素标记的抗IL-6抗体10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行 

 免费代测 人HNE 检测试剂盒,人4-羟基壬烯酸（HNE）ELISA试剂盒 厂家 实验结果计算
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，即为样品的实际浓度。