北京 人12-脂氧化酶/脂加氧酶(LOX-12)ELISA检测试剂盒 说明书

 北京 人12-脂氧化酶/脂加氧酶（LOX-12）ELISA检测试剂盒 说明书

• 产品类型:ELISA Kit
• 产品名称:人12-脂氧化酶/脂加氧酶（LOX-12）ELISA Kit
• 英文名称:Human 12-lipoxygenase,LOX-12 ELISA Kit
• 规格:96T
• 种属:Human
• 待测物名称:12-lipoxygenase,LOX-12缩写:LOX-12
• 检测范围:Request Information
• 灵敏度:Request Information
• 反应时间:-5h
• 所需样本体积:50-100ul
• 检测波长:450 nm
•  北京 人12-脂氧化酶/脂加氧酶（LOX-12）ELISA检测试剂盒 说明书  实验原理
  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
   北京 人12-脂氧化酶/脂加氧酶（LOX-12）ELISA检测试剂盒 说明书  试剂盒组成
  
   北京 人12-脂氧化酶/脂加氧酶（LOX-12）ELISA检测试剂盒 说明书  标本要求
  1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
  2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
   北京 人12-脂氧化酶/脂加氧酶（LOX-12）ELISA检测试剂盒 说明书  操作步骤
  1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
  
  2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
  3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
  5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
  6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
  7.温育：操作同3。
  8.洗涤：操作同5。
  9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
  10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
  11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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