人内皮脂肪酶(EL)ELISA Kit免费代测,进口 人内皮脂肪酶Elisa

 人内皮脂肪酶（EL）ELISA Kit免费代测,进口 人内皮脂肪酶Elisa

 中文简称人内皮脂肪酶elisa试剂盒  英文简称：（EL）ELISA KIT

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ELISA试剂组成
1．抗原 在ELISA中应用的抗原要求有较高的特异性、亲和力和纯度。主要有3类，即自然抗原、人工合成抗原和基因重组抗原。
2．抗体 在ELISA中应用的抗体可分为多克隆抗体（多抗）和单克隆抗体（单抗）。多抗取白免疫动物的抗血清，制备较简单，但抗血清成分复杂，除含针对抗原（多个表位）的抗体外，还含有多种其他抗体，亲和力和特异性相对要低于单抗，且制备周期长，批间差异较大。
3．酶和底物 在ELISA中Z常用的酶为HRP和ALP
（1）HRP：是一种糖蛋白，含糖量约18％，分子量为44kD，在蔬菜作物辣根中含量很高。（2）ALP：是一种磷酸酯的水解酶，用做示踪酶的ALP活性应在l 000U／mg以上。
4．固相载体 固相载体是ELISA中用以分离结合标记物和游离标记物的主要手段，应与各种免疫活性物质有良好的结合性能并且不改变其免疫活性。常用的固相载体有聚苯乙烯塑料和硝酸纤维素膜。
5．包被 将免疫活性物质（抗原或抗体）结合于固相载体上的过程称为包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纤维薄膜等；常用的方法有吸附法、化学交联法及亲和素-生物素间接包被法。 

ELISA测定步骤
 人内皮脂肪酶（EL）ELISA Kit免费代测,进口 人内皮脂肪酶Elisa 测定时一般需经过以下步骤：固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。ELISA操作较繁杂，操作不当将引起较大的误差。在操作中应注意以下5个方面。
1．随着病情的进展或由其他因素影响，某些抗体在机体内的含量发生大幅波动，因此有必要对标本进行预处理，例如对血清标本作适当稀释，或离心分离血脂等。间接法测定中，标本适当稀释还可降低非特异性反应。
2．加样一般使用加液器，在ELISA中一般有4次加样：加标本、加酶结合物、加底物和加终止液。加标本时必须每份标本使用一支移液器吸嘴，以免交叉污染。加酶结合物、底物和终止液时则不需更换吸嘴。
3．在成批手工检测中，还应注意操作时差的影响。加样及混匀时间的差异，使抗原抗体反应和酶促反应时间不一致，对竞争法及定量检测影响很大，不注意可能会导致错误结果或定量不准。
4．洗涤是ELISA操作过程中决定实验成败的一个关键步骤。目的是除去未结合的免疫反应物，终止抗原抗体反应，除去标本中与反应无关的成分、游离的酶标物以及反应过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。可用洗板机洗板或手工洗板，前者洗涤质量较好，各反应孔洗涤效果均一，批内、批间差异小，手工洗板应注意控制各孔洗涤效果，差异不宜太大。
5．准确判定结果须使用ELISA测读仪（酶标仪），比色法判读可选择单波长或双波长，根据反应液颜色的不同选用不同波长的滤光片，以空白孔校零测定反应孔的吸光度值（A值）。酶标仪具有良好的重复性。

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