石蜡RNA提取试剂盒
RNeasy FFPE Kit
(产品咨询:13570344479/QQ712628583)
简介:
从固定、石蜡包埋的组织切片中纯化总RNA
1.创新的方法用于克服造成的交联
2.有效的释放RNA而不破坏其完整性
3.GX的实验方案,在85分钟内即可获得纯化的RNA
RNeasy FFPE Kit专为从固定、石蜡包埋的组织切片中纯化总RNA而设计。独特的裂解和孵育条件逆转对RNA的修饰。并且裂解缓冲液可将RNA从组织切片中有效释放出来,防止RNA的进一步降解。试剂盒同样使用DNase和DNase Booster Buffer优化,去除基因组DNA的污染。使用RNeasy MinElute离心柱纯化获得的总RNA,洗脱体积可小至10 μl。整个纯化流程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上全自动进行。
详细信息:(产品咨询:13570344479/QQ712628583)
性能
使用RNeasy FFPE Kit从固定和包埋的样本中纯化获得的RNA的产量比用其他方法更高。回收得到的完整RNAZ小可达70 nt,并且几乎没有基因组DNA的污染。用该试剂盒从FFPE样本中纯化得到的RNA 片段非常适用于real-time RT-PCR等敏感的下游应用。
原理
用固定组织会导致RNA-RNA和RNA-蛋白质的交联,这会影响RNA在酶学分析中的性能。FFPE样本固定和包埋同样会导致核酸的严重片段化。RNeasy FFPE Kit提供了独特的裂解和孵育条件来逆转对RNA的修饰。裂解缓冲液能使RNA从FFPE组织样本中有效释放,并防止进一步的RNA降解。经优化的条件能纯化得到所有可用的RNA,使用RNeasy FFPE Kit从FFPE样本中得到的RNA的产量比其他方法更高。
操作流程
整个RNeasy FFPE操作流程可在85分钟内完成。使用蛋白酶K裂解样本仅需15分钟。裂解后,样本在80?C下孵育15分钟。之后,用DNase处理能有效去除样本中的基因组DNA,包括小的DNA 片段。,使用RNeasy MinElute离心柱即可收集纯化的RNA,洗脱体积14–30 ?l。纯化过程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上全自动进行。
应用
RNeasy FFPE Kit可纯化FFPE 样本中所有大于70 nt RNA,得到适用于RT-PCR等众多下游应用的RNA 片段。但是,从FFPE样本中纯化得到的RNA会严重片段化,不能用于需要完整RNA的下游应用。如果使用片段化RNA可能需要做些修饰(例如在RT-PCR时设计小的扩增子)。进行cDNA合成时,不能使用oligo-dT引物,而要使用随机或基因特异性引物。
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技术参数:
特点 | 参数 |
Applications | PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray |
Elution volume | 14–30 ?l |
Format | Spin column |
Main sample type | FFPE tissue samples |
Processing | Manual (centrifugation), automated (QIAcube) |
Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein | RNA |
Sample amount | 1*5 ?m to 4*10?m sections |
Technology | Silica technology |
Time per run or per prep | 70 minutes |
Yield | Varies |
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