EPI300 Chemically Competent Cell感受态价格上海语纯生物科技有限公司是一家专注于研发生产高品质人体组织源及动物组织源原代细胞、细胞系、感受态iPS细胞等产品,并提供专业技术服务外包的高新技术企业,公司总部位于上海。目前已经被各大高校列为指定合作商,上海交通大学、复旦大学、同济大学、上海中医药大学、浙江大学、上海第六人民医院、上海第十人民医院等。
感受态细胞(competent cell):理化方法诱导细胞,使其处于Z适摄取和容纳外来DNA的生理状态。
主要原理就是通过处理使细胞的通透性变大,直观的说,使得细胞膜表面出现一些孔洞,便于外源基因或载体进入感受态细胞。由于细胞膜的流动性,这种孔洞会被细胞自身所修复。CaCl2法
1.将快速生长的大肠杆菌置于经低温(0℃)预处理的低渗氯化钙溶液中,便会造成细胞膨胀,同时Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构,促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来,离开所在区域,诱导细胞成为感受态细胞
EPI300 Chemically Competent Cell感受态价格细胞膜通透性发生变化,极易与外源DNA相粘附并在细胞表面形成抗脱氧核糖核酸酶的羟基-磷酸钙复合物。
联合其它的二价金属离子(如Mn、Co)、DMSO或还原剂等物质处理细菌,则可使转化率提高100~1000倍。
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EPI300 Chemically Competent Cell感受态价格2.此时,将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激(90s),细胞膜的液晶结构会发生剧烈扰动,并随机出现许多间隙,外源DNA就可能被细胞吸收。进入细胞的外源DNA分子通过复制、表达,实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状。
EPI300 Chemically Competent Cell感受态价格3.将转化后的细胞在选择性培养基上培养,筛选出带有外源DNA分子的阳性克隆。2.主动洗板:如果有主动洗板机,应在娴熟运用后再用到正式实验进程中。待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等
电转法
电击法不需要预先诱导细菌的感受态,依靠短暂的电击,促使DNA进入细菌,转化率能达到109~1010转化子/ug闭环DNA。因操作简便,愈来愈为人们所接受
意义编辑
![](http://item.yiqi.com/pic/ConPic/3/201905280936599769.png)
将构建好的载体转入感受态细胞进行表达,不仅可以检验重组载体是否构建成功,Z主要的是感受态细胞作为重组载体的宿主可以进行后续实验,如蛋白质表达纯化等工作。
JM110 Chemically Competent Cell |
XL1-Blue Chemically Competent Cell |
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BW25113 Chemically Competent Cell |