长效期 SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )(2-30KD)20L

长效期 SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )(2-30KD)20L二：细胞裂解
5. 如果用本产品 A 型，用 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（1 mL 1×PBS 缓冲液+50 uL 溶液 A+ 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液）重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选 1K-10K 频率处理 15 次，每次20 秒，间隔 1 分钟（必需放置在冰上）。裂解物不能粘稠，否则会堵塞
层析柱。
6. 如果用本产品 B 型，在 1 mL 冰浴的新鲜配制的细胞裂解液（在 20 mL1×PBS 缓冲液中加入所有 30 mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成 1 mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置）中加入 25 uL 10 mg/mL 的 PMSF 溶液和 1 uL Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置 30 分钟，得到细菌裂解物。
7. 将超声或酶法细胞裂解物在 13000 g 4℃离心 10 分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性 GST 标记蛋白。
三：层析柱的制备和 GST 蛋白纯化
8. 摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 GST 蛋白产量决定，100 mL 菌液一般使用 200 uL 介质即可）。下列步骤各溶液的用量均针对 200 uL 介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9. 用 5 mL 预冷的 1×PBS 缓冲液洗柱。
10.将第 7 步得到的上清液（含可溶性 GST 标记蛋白）上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于 SDS-PAGE 电泳。GST 和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在 0.2-1 mL/分钟即可。如要提高 GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合 30 分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11.用 0.5-2 mL 1×PBS 缓冲液洗柱，收集并保存穿透液（含杂蛋白）。
12.用 0.2-1 mL GST 洗脱液洗柱，收集并保存穿透液（含 GST 标记蛋白）。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在 4℃放置，需立即用于后续处理（如浓度测定或 SDS-PAGE 电泳）或-80℃长期放置。
13.对收集的 2 种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或 SDS-PAGE 分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用 Bradford 法或 OD 检测法（1 OD280 约等于 0.5 mg/mL 蛋白）测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于 GST 的分子量为 26 KD，所以在 SDS-PAGE 胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大 26 KD。
原理及特点:
重组蛋白 N 端的 GST 谷胱甘肽 S 转移酶（Glutathione S Transferase）能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用 GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化 GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，具有下列
长效期 SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )(2-30KD)20L特点：
1. 一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达 GST 标记蛋白的细菌（酵母、杆状病毒、培养细胞）即可，非常方便。
2. 专一性强，一次过柱即可获得纯度高达 95%的 GST-标记蛋白。
3. 只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的 GST 标记蛋白。
4. 每次可以处理 20 mL 的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5. 提供 4 mL 浓度为 50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附 5-10 mgGST 标记蛋白质。
6. 本介质可以反复使用多次。
一:重组蛋白的表达和细菌收集
1. 37℃振荡培养 20 mL 含表达质粒的细菌到 OD600=0.6-0.8。
2. 加 IPTG 到终浓度为 0.1 mM，30℃振荡培养 3 小时或 22℃振荡培养 8小时（或过夜）。
3. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清。
4. 用 1×PBS 缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000 g 离心 10 分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。

大鼠抵抗素(Resistin)elisa试剂盒rat Resistin ELISA Kit96T/48T

大鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒rat prolactin,PRL ELISA Kit96T/48T

大鼠促生长激素释放激素(GRH)ELISA试剂盒rat growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit96T/48T

大鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒rat adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit96T/48T

大鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒rat follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit96T/48T

大鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒rat Estradiol receptor,ER ELISA Kit96T/48T

大鼠前心钠肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒Rat Pro Atrial Natriuretic Peptide,Pro-ANP ELISA Kit96T/48T

大鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒Rat Big Endothelin,Big ET ELISA Kit96T/48T

大鼠迟现抗原(VLA)ELISA试剂盒Rat very late appearing antigen,VLA ELISA Kit96T/48T

大鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒Rat Calcitonin,CT ELISA Kit96T/48T

大鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒Rat Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA Kit96T/48T

大鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒Rat soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA Kit96T/48T

大鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒 Rat Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA Kit96T/48T

大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒Rat Cortisol ELISA Kit96T/48T

大鼠雌二醇(E2)ELISA试剂盒Rat Estradiol,E2 ELISA Kit96T/48T

大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒Rat Testoterone,T ELISA Kit96T/48T

大鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒Rat Free Testoterone,F-TESTO ELISA Kit96T/48T

大鼠雄烯二酮(ASD)ELISA试剂盒Rat Androstenedione,ASD ELISA Kit96T/48T

大鼠雌三醇(E3)ELISA试剂盒Rat Estriol,E3 ELISA Kit96T/48T

大鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒Rat 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit96T/48T

大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒Rat Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit 96T/48T

大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒Rat thyroxine,T4 ELISA Kit96T/48T

大鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒Rat Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit96T/48T

大鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒Rat Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit96T/48T

大鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒Rat Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA Kit96T/48T

大鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒Rat Insulin,INS ELISA Kit96T/48T

大鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒Rat C-Peptide ELISA Kit96T/48T

大鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒Rat Chorionic Gonadotrophin,CG ELISA Kit96T/48T

大鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒Rat luteotropic hormone,LH ELISA Kit96T/48T

大鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒 Rat Anti-myocardial antibody,AMA ELISA Kit96T/48T

大鼠抗中性粒/ZX体抗体(ACA)ELISA试剂盒Rat anti-centrol ａnd centrosome antibody,ACA ELISA Kit96T/48T

大鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA试剂盒Rat phosphatidylinositol antibody IgG/IgM,PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit96T/48T

大鼠复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒Rat complex edprostate specific antigen,cPSA ELISA Kit96T/48T

大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒 Rat trypsin ELISA Kit96T/48T

大鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒 Rat Interferon β,IFN-β/IFNB ELISA Kit96T/48T

大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA试剂盒 Rat platelet factor 3, PF3 ELISA Kit96T/48T

大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒Rat Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit96T/48T

大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA试剂盒Rat Caveolin-1,Cav-1 ELISA Kit96T/48T

长效期 SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )(2-30KD)20L大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒 Rat Vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit96T/48T

大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 Rat Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit96T/48T

大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 Rat Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit 96T/48T

大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒Rat Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA Kit96T/48T

大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA试剂盒Rat nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit96T/48T

大鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒Rat Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA Kit96T/48T

大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒Rat Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA Kit96T/48T

大鼠神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒Rat Neurotrophin 4,NT-4 ELISA Kit96T/48T

大鼠神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒Rat Neurotrophin 3,NT-3 ELISA Kit 96T/48T

大鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒Rat Nerve growth factor,NGF ELISA Kit96T/48T

大鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA试剂盒Rat macrophage inflammatory protein 3α,MIP-3α ELISA Kit96T/48T

大鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒Rat Laminin,LN ELISA Kit96T/48T

大鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒 Rat Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit96T/48T

大鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒Rat Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit96T/48T

大鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒 Rat Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit96T/48T

大鼠白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒 Rat Interleukin 1α ,IL-1α ELISA Kit96T/48T

大鼠白介素18(IL-18)ELISA试剂盒Rat Interleukin 18,IL-18 ELISA Kit96T/48T

大鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 Rat Interleukin 10,IL-10 ELISA Kit96T/48T

大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒Rat Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA Kit96T/48T

大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒Rat Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit96T/48T

大鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒Rat Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit96T/48T

大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒 Rat intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1 ELISA Kit96T/48T