人肝癌细胞氟尿嘧啶耐药株使用说明书

产品名称：人肝癌细胞氟尿嘧啶耐药株使用说明书
规格：5×105

保存条件：4℃保存一年;-20℃长期保存

储存：液氮。

运输：干冰(第二代培养末期液氮冻存)。

免费运输，保证运输中细胞的正常生长，关于其价格、报价、货期，请咨询我们。

产品特点：活性好、存活率高、实验成果特征明显

细胞介绍

该细胞为氟尿嘧啶处理的人肝癌耐药细胞株。

细胞特性

1）来源：肝癌细胞

2）形态：上皮细胞样

3）含量：>1x106个/mL

4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存：使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

细胞用途：仅供科研使用。

细胞培养步骤

一．培养基及培养冻存条件准备：

注意：客户收到细胞后按照下面的要求操作：培养瓶里面的培养液是不含药物的。待细胞长到 70-80%的汇合度时，去掉培养液，加入含 8000ng/ml FU 药物的培养液，放入培养箱，这段时间肯定会有小部分细胞悬浮起来，但是不要紧，通过换液可以去掉，下面的细胞待长满就可以消化传瓶了，这时可以一直用含药培养液来消化培养细胞，一两代之后可以将药物浓度提高15000ng/ml，含药培养液用于细胞培养都没问题的，冻存的时候就不要在冻存液里面加药物了。

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022，添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%，添加1%双抗，20000ng/ml 氟尿嘧啶。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

人肝癌细胞氟尿嘧啶耐药株使用说明书注意事项：

1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

人肝癌细胞氟尿嘧啶耐药株使用说明书特点： 

1) 特异性强：只对肿瘤细胞进行有效识别和杀灭，而不伤害正常组织和细胞；抗瘤谱广。 

2) 对体内各种肿瘤细胞均能有效ZL。 

3) 安全性好，除可能出现的发热、少量出血外，无其他不良反应。 

冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。

冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。

公司所售细胞均为原代细胞、传代细胞，细胞系。细胞经过严格的控制（从组织来源、实验室条件等方面），产品名称纯度可达98％。不同的细胞传代次数不一。多数细胞种类是从胚胎提取，于原代（或二代）冻存在液氮中。细胞采用干冰运输，客户收到细胞后，从干冰中取出放入液氮中保存，待实验安排好后，解冻后即可以进行复苏培养。公司实验室的细胞、培养基都是经过严格检验，分离、配制而成，产品质量过硬。

GLTPD2核心结合因子α1抗体(成骨特异性转录因子)Cbfα10.1ml

GLTSCR2核YZ蛋白磷酸酶1抗体0.1ml

GluA4核因子1A抗体0.2ml

Glucagon核因子1B抗体0.1ml

Glucagon Receptor核因子1C型抗体0.1ml

Glucoamylase核因子1X抗体0.1ml

Glucocorticoid Receptor beta核因子2相关因子2抗体0.1ml

Glucocorticoid receptor(GR) 核因子2相关因子2抗原0.2ml

Glucokinase regulatory protein核因子NFκB激活蛋白1抗体0.2ml

Glucose 6 phosphatase 2核因子κBYZ蛋白E抗体0.2ml

Glucose 6 phosphatase alpha核因子κBYZ蛋白α抗体(IκB-α)0.2ml

Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase核因子κBYZ蛋白β抗体0.2ml

Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase核因子活化T细胞胞浆蛋白2抗体0.1ml

Glucose Oxidase核因子活化T细胞胞浆蛋白3抗体0.1ml

Glucosidase 2 subunit beta核有丝分裂器NuMA蛋白抗体0.1ml

GLUD2核转录调节因子YY1抗体0.1ml

Glu-Glu Tag核转录因子25抗体0.2ml

Glu-Glu Tag peptide核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体0.2ml

GLUR/glutathione reductase核转录因子NF-κB受体/核因子kB受体活化因子抗体0.1ml

GluR1核转录因子NF-κB受体抗体(核因子kB受体活化因子)0.2ml

GLUR2核转录因子SOX14抗体0.1ml

GLUR4核转录因子SOX22抗体0.2ml

GLUT1核转录因子SOX4抗体0.1ml