规格:5×106
运输方式:干冰或者活体细胞运输,保证细胞运输中的存活率。
特点:细胞代数为4-5代左右。
包装:内层无菌自封袋、专用防压泡沫盒、外层防压保温气泡袋、说明书。
细胞介绍
这是一株耐药细胞株。
细胞特性
1)来源:人结肠癌
2)形态:上皮细胞样
3)含量:>1x106 个/mL
4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
细胞培养步骤
一.培养基及培养冻存条件准备:
注意:客户收到细胞后按照下面的要求操作:培养瓶里面的培养液是不含药物的。待细胞长到 70-80%的汇合度时,去掉培养液,加入含 8000ng/ml FU 药物的培养液,放入培养箱,这段时间肯定会有小部分细胞悬浮起来,但是不要紧,通过换液可以去掉,下面的细胞待长满就可以消化传瓶了,这时可以一直用含
药培养液来消化培养细胞,一两代之后可以将药物浓度提高到 15000ng/ml,含药培养液用于细胞培养都没问题的,冻存的时候就不要在冻存液里面加药物了。
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022,添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%,添加1%双抗,15000ng/ml 氟尿嘧啶。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
人结直肠癌氟尿嘧啶耐药株特价供应操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
GCDFP15骨骼肌烯醇化酶多肽0.1ml
GCDGP15骨骼肌烯醇化酶抗体0.1ml
GCDH骨骼肌细胞线粒体膜蛋白PARL抗体0.1ml
GCET1骨碱性磷酸酶抗体0.2ml
GCET2骨桥蛋白(多肽抗原)0.1ml
GCHFR骨桥蛋白(抗原)0.1ml
GCK(Human glucokinase) ELISA Kit骨桥蛋白/分泌型磷蛋白1抗体0.2ml
GCLC骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1)0.1ml
GCM2基质干细胞抗原1抗体0.1ml
GCMA基质干细胞抗原2抗体0.1ml
Gcn1l1骨涎蛋白0.1ml
GCN2骨涎蛋白抗体0.1ml
GCNF骨形态发生蛋白1/胶原C蛋白肽链内切酶抗体0.1ml
GCNT1骨形态发生蛋白10抗体0.1ml
GCNT2骨形态发生蛋白11抗体0.2ml
GCNT3骨形态发生蛋白15抗体0.2ml
GCNT6骨形态发生蛋白2抗体0.2ml
GCNT7骨形态发生蛋白2受体抗体0.2ml
GCOM1骨形态发生蛋白3抗体0.1ml
GCP2骨形态发生蛋白4(抗原)0.1ml
GCP-2/CXCL6(Human granulocyte chemotactic protein-2,GCP-2) ELISA Kit骨形态发生蛋白4抗体0.1ml
GCP3骨形态发生蛋白5抗体0.1ml
猪屎豆Crotalaria pallidaSalicyl alcohol长管假茉莉素E1990/1/7C8H8O4
猪屎豆Crotalaria pallidaChebulinic acid长寿花糖甙18942-26-2C8H8O4
人结直肠癌氟尿嘧啶耐药株特价供应猪屎豆Crotalaria pallidaGuaiacol掌叶半夏甲1990/5/1C8H8O4
猪屎豆Crotalaria pallidaDL-Benzoin沼菊素氯海德林579-44-2C8H8O4
猪屎豆Crotalaria pallidaPunicalagin柘树口山酮 A65995-63-3C8H8O4
竹红菌Hypocrella Bambusae SaccEupatilin蔗糖22368-21-4C8H8O5
竹叶西凤芹Seseli mairei WolffBlumeatin贞桐甙 A118024-26-3C8H8O5
梓Catalpa ovataBlumeatin B正毛兰素79995-67-8C8H9NO2
梓Catalpa ovata11,13-Dihydroivalin芝麻酚150150-61-1C9H10O
梓Catalpa ovata4'-O-Methyltaxifolin芝麻林素70411-27-7C9H10O
梓Catalpa ovata7-O-Methyleriodictyol芝麻素51857-11-5C9H10O2
梓Catalpa ovataOmbuin知母皂苷A1529-40-8C9H10O2
梓Catalpa ovataPadmatin知母皂苷AⅢ80453-44-7C9H10O2
梓Catalpa ovataQuercetin 3,4'-dimethyl ether知母皂苷B33429-83-3C9H10O3
梓Catalpa ovataTamarixetin知母皂苷B II603-61-2C9H10O3
梓Catalpa ovata3-Epiglochidiol知母皂苷BⅢ29028-10-2C9H10O3
梓Catalpa ovataGlochidone知母皂苷E6610-55-5C9H10O3
梓Catalpa ovataGlochidonol知母皂苷元23963-54-4C9H10O4
梓Catalpa ovataSoyacerebroside II栀子苷115074-93-6C9H10O4
梓Catalpa ovata(+)-S-Myricanol glucoside栀子醛449729-89-9C9H10O4