人肺癌紫杉醇耐药株

ATCC细胞

人肺癌紫杉醇耐药株条件：

　　完全培养基：DMEM高糖培养基90%;胎牛血清10%。

　　培养条件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%

人肺癌紫杉醇耐药株传代方法：

　（一）收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。 (一)如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个 瓶消毒后放到超菌 台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下 10ml培养液在瓶内继续培养。

　（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

　　1. 弃去培养液，用PBS(不含钙，镁离子)洗1-2次。

　　2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中， 倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将 培养瓶倒转大约30 秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分 散，轻敲几下培养培养瓶， 细胞随即脱落下来。

　　3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。1:3~1:6 传代;2~3天1次。

人肺癌紫杉醇耐药株注意事项

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

人肺癌紫杉醇耐药株储存方法

冻存方法：冻存液：基础培养基 +5%DMSO+20%FBS

储存：液氮储存

（1）取培养2～3天生长旺盛的细胞，用细胞培养液将细胞配成2×106～2×107/ml。

（2）在1ml细胞冻存管中加入0.5ml细胞悬液，0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亚砜（或甘油），混匀后密封。置4℃ 1小时，－20℃ 2小时，然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上过夜后浸入液氮中。

3、细胞株的复苏：

复苏时，从液氮中取出冻存管，立即置37℃水浴中融化细胞。将细胞直接加入10ml含15％小牛血清的RPMI-1640培养液中，置37℃ 5％CO2饱和水汽二氧化碳培养箱中培养。悬浮细胞待细胞全部沉降后小心吸去上清液，更换新鲜的上述培养液，继续培养；帖壁细胞则培养2～3实验。

上海杏宜提供ATCC 细胞|细胞系|细胞株|肿瘤细胞|细胞|贴壁 细胞|悬浮细胞|,细胞库管理规范,提供的细胞 株背景清楚,提供 参考文献和培养条件。

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