工作原理
人黑色素细胞刺激素(MSH)elisa试剂盒实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗C3抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底a物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的C3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
需要但未提供的材料
1. 可在450nm处进行读数的酶标仪;
2. 能精确吸取10-200μL的移液器;
3. 可调多道(8)移液器(50-200μL);
4. 供可调多道移液器使用的试剂存放槽;
5. 洗瓶或洗板机;
6. 蒸馏水或去离子水;
7. 1升的圆柱形量筒;
8. 移液器:1和(10或25 mL);
9. 移液器枪头;
10. 纸巾;
11. 计时器,用以监控温育步骤;
12. 处理池和消毒剂(例如:0.5% 次氯酸钠, 10% 家用漂白水);
操作流程
人黑色素细胞刺激素(MSH)ELISA试剂盒操作步骤
试剂盒应平衡至室温(20-25°C )再试验。 取出所需反应板。
1. 加入10ul标准品(Standards)、10ul标本于相应反应板孔中。
2. 每孔加入40ul Anti mouse IL-1 Biotin 和40ul Anti mouse IL-1 POD。轻轻混匀30秒,封住板孔,室温温育 45分钟。
3. 洗板:甩尽板内液体,用洗涤液洗涤反应板(每孔内加入350ul洗涤液),并去除水滴(在厚叠吸水纸上拍干);反复洗涤5次。
4. 每孔加入100ul显色液, 轻轻混匀10秒,室温温育20分钟。
5. 每孔加入100ul终止液(Stop Solution)。轻轻混匀30秒;30分钟内在450nm处读OD值。 以OD值为纵坐标,以标准品浓度为横坐标,绘制标准曲线。根据样品的OD值可在标准曲线上查出其浓度。
注意事项
人黑色素细胞刺激素(MSH)ELISA试剂盒操作注意事项(1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
(2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
(3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
(4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
(5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
(6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
(7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
(8)加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
(9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
ELISA试剂盒的优点体现:
·特异性高:进行了广泛的非特异性排查,避免了由于交叉反应和干扰导致的实验数据误差。
·精 度 高:通过加标回收率和线性稀释实验,确保样本值的准确性,精确度高于同类产品(较低的CV%)。
·重复性好:lot-to-lot检测确保Z小的批间差异。
·可靠性强:经优化的试剂盒组分可有效的阻止假阳性和假阴性试验结果。
·标准曲线:在保证JZ数据的前提下提供较宽的检测范围,以满足需求。
·价格低廉:原装进口RD试剂,国内分装配置,大大减少了客户因为价格高而必须购买国产试剂盒的顾虑。
安全性
(1)避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
(2)实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
(3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
客户好评
来自同济大学魏老师对我司人黑色素细胞刺激素(MSH)ELISA试剂盒的使用感言
同济大学魏老师说,次知道【上海沪鼎生物科技有限公司】是在百度上查产品看见的,后来才知道他们同校的齐老师有过在我司选购产品的经验,先在在齐老师那里打听一二才决定在我司咨询产品的。从魏老师次在我司购买产品到现在差不多有六年多的时间,期间一直都在我司选购ELISA试剂盒产品,对我司产品客服以及销售模式都非常了解,昨日魏老师来电咨询产品就和我司业务经理聊起了对我司ELISA试剂盒的使用感言以及建议!
魏老师说,购买我司Elisa试剂盒并选择待测服务很方便,只收取试剂盒的费用,其他辅助试剂全部免费比较经济划算。自己做实验效果也很好,而且整个流程客服服务始终如一。我对你们公司非常满意,不然就不会这么多年一直在你们公司购买。我对你们公司有个建议,就是原装进口货期在短一点就更了。
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