工作原理
人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)elisa试剂盒实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗C3抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的C3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
需要但未提供的材料
1. 可在450nm处进行读数的酶标仪;
2. 能精确吸取10-200μL的移液器;
3. 可调多道(8)移液器(50-200μL);
4. 供可调多道移液器使用的试剂存放槽;
5. 洗瓶或洗板机;
6. 蒸馏水或去离子水;
7. 1升的圆柱形量筒;
8. 移液器:1和(10或25 mL);
9. 移液器枪头;
10. 纸巾;
11. 计时器,用以监控温育步骤;
12. 处理池和消毒剂(例如:0.5% 次氯酸钠, 10% 家用漂白水);
注意事项
人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
保存: 贮藏于2-8°C。
ELISA试剂盒的优点体现:
·特异性高:进行了广泛的非特异性排查,避免了由于交叉反应和干扰导致的实验数据误差。
·精 度 高:通过加标回收率和线性稀释实验,确保样本值的准确性,精确度高于同类产品(较低的CV%)。
·重复性好:lot-to-lot检测确保Z小的批间差异。
·可靠性强:经优化的试剂盒组分可有效的阻止假阳性和假阴性试验结果。
·标准曲线:在保证JZ数据的前提下提供较宽的检测范围,以满足需求。
·价格低廉:原装进口RD试剂,国内分装配置,大大减少了客户因为价格高而必须购买国产试剂盒的顾虑。
安全性
(1)避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
(2)实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
(3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作流程
人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒操作步骤
试剂盒应平衡至室温(20-25°C )再试验。 取出所需反应板。
1. 加入10ul标准品(Standards)、10ul标本于相应反应板孔中。
2. 每孔加入40ul Anti mouse IL-1 Biotin 和40ul Anti mouse IL-1 POD。轻轻混匀30秒,封住板孔,室温温育 45分钟。
3. 洗板:甩尽板内液体,用洗涤液洗涤反应板(每孔内加入350ul洗涤液),并去除水滴(在厚叠吸水纸上拍干);反复洗涤5次。
4. 每孔加入100ul显色液, 轻轻混匀10秒,室温温育20分钟。
5. 每孔加入100ul终止液(Stop Solution)。轻轻混匀30秒;30分钟内在450nm处读OD值。 以OD值为纵坐标,以标准品浓度为横坐标,绘制标准曲线。根据样品的OD值可在标准曲线上查出其浓度。
客户好评
来自同济大学魏老师对我司人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒的使用感言
同济大学魏老师说,次知道【上海沪鼎生物科技有限公司】是在百度上查产品看见的,后来才知道他们同校的齐老师有过在我司选购产品的经验,先在在齐老师那里打听一二才决定在我司咨询产品的。从魏老师次在我司购买产品到现在差不多有六年多的时间,期间一直都在我司选购ELISA试剂盒产品,对我司产品客服以及销售模式都非常了解,昨日魏老师来电咨询产品就和我司业务经理聊起了对我司ELISA试剂盒的使用感言以及建议!
魏老师说,购买我司Elisa试剂盒并选择待测服务很方便,只收取试剂盒的费用,其他辅助试剂全部免费比较经济划算。自己做实验效果也很好,而且整个流程客服服务始终如一。我对你们公司非常满意,不然就不会这么多年一直在你们公司购买。我对你们公司有个建议,就是原装进口货期在短一点就更了。
感谢魏老师的支持与建议,您的宝贵建议我司定当商讨出解决方案,尽量缩短一些货期。公司一直致力于不断倾听、挖掘与满足客户的各种需求,孜孜不倦地追求产品和技术服务的突破与创新,立志成为国际上有影响力的、对生命科学研究有巨大推动作用的ZG生物技术公司。