人内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒专业提供,有96T/48T两种规格,包括96/48孔酶标包被板、酶标试剂、样品稀释液、显色剂AB液、标准品、浓缩洗涤液,封板膜,说明书等。
参数规格
产品名称:人内皮脂肪酶(EL)elisa试剂盒
产品库存:提供现货(因销量原因库存会有所变动具体请与销售人员确认)
产品保存:2-8℃,有效期6个月
使用范围:仅供科研使用,不得用于临床,使用前请仔细阅读产品说明书。
说明书:说明书随货发送或直接联系销售人员索取。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属:大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭elisa试剂盒等种属
检测方法:酶联免疫法/酶免法(elisa)
ELISA试剂盒近期订单详情:
同济大学 顾教授 8盒
曙光医院 胡同学 4盒
江苏大学 陈副教授 7盒
中科院上海分院 方主任 6盒
上海有机研究所 毛经理 3盒
华大基因业务部 陶经理 9盒
复旦大学 刘教授 12盒
标本要求
人内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒常见样本的处理方法:
1. 血清样本的处理方法
对于血清样本的处理,都是离心取上清液待检,在做预实验过程中,血清样本稀释5倍直接进行实验。
2. 牛奶样本的处理方法
方法一:取10ml牛奶放入离心管,加入10ml乙酸乙酯,超声震荡30min,然后4000g离心10min(如两相之间出现乳化层,则将样品瓶放在80℃的水浴中约5min,再离心)移取1ml乙酸乙酯层至另外试管中,60℃氮气流下蒸干,残留物用缓冲液2ml缓冲后备用,前处理过程约需2小时。
方法二:取10ml牛奶10℃3500G离心10MIN,祛除上层脂肪,取5ml脱脂奶粉加入150微升17.2%亚铁,出现沉淀,漩涡混合,然后加入150微升53.5%硫酸锌。再次漩涡混合。15摄氏度3500g离心10分钟,取上层清液用缓冲液1:2稀释待用,前处理过程所需1小时。
3. 粪便样本的处理方法
对于粪便样本的处理,一般要求采集干的粪便,稀的粪便不利于检测(对样本处理带来难度,也会使准确性降低)。
粪便样本处理如下:
① 收集:直接用医院临床收集粪便的耗材进行收集;
② 采样:一般选取的重量不能低于50mg,以1g为基准。称取1g加9ml的PBS(磷酸盐缓冲液,PH控制在7.2-7.4,浓度为0.01mol/L)换算成匀浆的比例就是10%;
③ 保存:匀浆后的样本如果采样周期在1周之内,可以保存在2-8℃,如果取样周期在一个礼拜以上一个月以内,-20℃保存。如果取样周期超过1个月,保存在-80冰箱!低温保存的话,尽量避免反复冻融。
4. 植物组织样本的处理方法
植物组织的提取,不管是根茎组织还是叶片组织还是果实组织,都应该采用鲜重的计重方式,一般要遵循以下原则:
① 称取的组织重量不能低于50mg。
② 匀浆的比例按照10%,即1g组织加9ml的匀浆液,匀浆液一般选取PBS(PH=7.2-7.4)
③ 组织在匀浆器匀浆过程中,匀浆液应该分2次加进去,这样匀浆更充分。
④ 充分匀浆完成后离心取上清,离心机的转数选取2000-3000转每分,转数不宜超过5000.离心时间为15-30分钟。
操作流程
人内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒【http://www.tsz168.com/产品查询网址】实验操作程序(具体请参照说明书):
① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干
② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干
③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干
④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加终止液
⑤ 用ELISA检测仪测定OD值
订购流程
人内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒【http://www.tsz168.com/Products/T214335.html批发网址】 订购说明:
1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
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3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日价格为准。
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注意事项
试剂的准备之保温
在 ELISA 中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA 中似不恰当。ELISA 属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有Z贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA 反应总是需要一定时间的温育。
温育常采用的温度有 43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELI SA 方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2 小时,产物的生成可达顶峰。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在 43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成Z多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA 中一般不予采用。
保温的方式除有的 ELISA 仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴,可将ELISA 板置于水浴箱中,ELISA 板底应贴着水面,使温度迅速平衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA 板应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的材料如金属等,在盒底垫湿的纱布,将ELISA 板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度,特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。室温温育的反应,操作时的室温应严格限制在规定的范围内,标准室温温度是指 20-25℃,但具体操作时可根据说明书的要求控制温育。室温温育时,ELISA 板只要平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板同时测定。
使用方法
人内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒使用方法
1. 使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2. 取所需用量包被微孔板条,设空白、阴性及阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3. 阴性、阳性对照孔分别加阴性、阳性对照血清100μl;样品孔样本1:100稀释后加100μl;空白对照孔不加。
4. 混匀,置37℃温浴30分钟。
5. 扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置60秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6. 每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。
7. 置37℃温浴30分钟。
8. 洗涤,同步骤5。
9. 每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
10.每孔加终止液50μl,混匀,置酶标仪450nm处测各孔A值(建议用双波长450nm、630nm)。
常用型号
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