ELISA检测试剂盒,人P53ELISA试剂盒价格_详细资料

产品信息

人P53(P53)ELISA试剂盒使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

工作原理
一、“人P53(P53)elisa试剂盒”实验原理
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
二、样品收集、处理及保存方法
(1）血清－－－－-操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
(2）血浆－－－－-EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
(3）细胞上清液－－-1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
(4）组织匀浆－－－－-将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
(5）保存－－－－－－如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作流程
三、人P53(P53)ELISA试剂盒操作步骤
(1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
(2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
(3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
(4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
(5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
(6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
(7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
(8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
(9）在450nm波长处测定各孔的OD值。
常见问题
四、“人P53(P53)ELISA试剂盒”常见问题
实验中Z可能出现问题
一、所有孔未显色？
分析原因：
1、微孔加入抗体后，洗板不彻底，微孔中存在游离的抗体。
2、用错试剂。
3、在操作中忘记加酶或抗体。
解决办法：
1、检查洗板器械，比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加样前，要看清瓶签。
3、严格按说明书操作步骤进行实验，确保每步都到位。
客户好评
五、人P53(P53)ELISA试剂盒客户评价
真心的感谢上海恒远生物，贵公司专业的技术和热情服务态度，让我倍感亲切！南昌大学研究院：张老师
在此，我非常推荐恒远生物，因为他们不仅仅为我们提供实验产品，还为我们提供研究提供了非常好的解决方案。浙江大学：付老师
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