产品资料
【名称】:人血管内皮细胞生长因子受体3(VEGFR-3)elisa试剂盒【规格】:48T/96T
【方法】:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【性状】: 液态
【elisa试剂盒种属】马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
【标本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
【用途】:科研 实验
【贮存】: 贮存于2℃-8℃.如有需要,我们将竭城为顾客提供售前,售中,售后的全方位服务!
需要但未提供的材料
1. 可在450nm处进行读数的酶标仪;
2. 能精确吸取10-200μL的移液器;
3. 可调多道(8)移液器(50-200μL);
4. 供可调多道移液器使用的试剂存放槽;
5. 洗瓶或洗板机;
6. 蒸馏水或去离子水;
7. 1升的圆柱形量筒;
8. 移液器:1和(10或25 mL);
9. 移液器枪头;
10. 纸巾;
11. 计时器,用以监控温育步骤;
12. 处理池和消毒剂(例如:0.5% 次氯酸钠, 10% 家用漂白水);
注意事项
人血管内皮细胞生长因子受体3(VEGFR-3)ELISA试剂盒注意事项
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
保存: 贮藏于2-8°C。
试剂的准备之洗涤
洗涤在 ELISA 过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELSIA 就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA 操作中,洗涤是Z主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
洗涤的方式除某些 ELISA 配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,过程如下:
(1)浸泡式 a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2 分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;d.吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;e.重复操作c 和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温 20,其浓度可在0.05%-0.2%
之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
(2)流水冲洗式流水冲洗法Z初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗 2 分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2 分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。
已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。
标本要求
人血管内皮细胞生长因子受体3(VEGFR-3)ELISA试剂盒标本收集 仪器
1. 本试剂盒可使用血清、血浆、细胞培养上清液、组织液标本。
2. 室温(20-25℃)下保存标本不要超过8小时。2-10℃保存标本,不超过48小时。如
耽搁的时间更长,请在-20℃或更低的温度下保存标本。标本避免多次冻融,这样可能会损失蛋白活性,产生错误结果。
准备工作
1. 浓缩洗涤液(20X)用双蒸水稀释成1X(至 500ml)。
操作步骤
试剂盒应平衡至室温(20-25°C )再试验。 取出所需反应板。
1. 加入10ul标准品(Standards)、10ul标本于相应反应板孔中。
2. 每孔加入40ul Anti mouse IL-1 Biotin 和40ul Anti mouse IL-1 POD。轻轻混匀30秒,封
住板孔,室温温育 45分钟。
3. 洗板:甩尽板内液体,用洗涤液洗涤反应板(每孔内加入350ul洗涤液),并去除水滴(在厚叠吸水纸上拍干);反复洗涤5次。
4. 每孔加入100ul显色液, 轻轻混匀10秒,室温温育20分钟。
5. 每孔加入100ul终止液(Stop Solution)。轻轻混匀30秒;30分钟内在450nm处读OD值。
以OD值为纵坐标,以标准品浓度为横坐标,绘制标准曲线。根据样品的OD值可在标准曲线上查出其浓度。
正确操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件
1. 加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
2. 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
3. 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4. 合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
品质保证
人血管内皮细胞生长因子受体3(VEGFR-3)ELISA试剂盒 高质量的货物运输保证
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