产品资料
详细参数 产品名称 豚鼠白介素4(IL-4)elisa试剂盒
规 格 (48T/96T)
样品类型 血清、血浆、细胞培养上清等样品类型
检测方法 酶联免疫法
特 异 性 公司ELISA试剂盒具有较高的灵敏度和出色的特异性
交叉反应 由于当前的酶联免疫科学技术和知识有限,现有技术不可能完成药物 检测的靶抗原之间和所有其他物种的类似物。因此,交叉反应可能仍然存在
样 本 量 50-100 μL
实验时间 1–4.5h
储存条件 2-8°C
储存方法 可以存储在2 - 8°C长达1个月(专家建议:4°C恒温保存,酶免试 剂盒实验效果更佳)。对于长期存储,请在-20°C的存储。尽量保持试验板在密 封铝箔袋,避免潮湿
有 效 期 6 months
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
注意事项
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
化学试剂性能评价方法主要性能指标:
1. 稳定性:指在规定条件下经过一段时间的保存,仍能达到相应的性能指标,如试剂空白 吸光度、线性范围、灵敏度等。
2. 反应灵敏度:指单位浓度(或活性)的测定物反应所产生的反应度,反应度越高,灵敏度 越大。
3. 精密度:结果间相互符合的一致程度
4. 准确度:与参考测定程序结果的一致性
5. 线性范围:在规定的重复性和线性偏差下,测得的浓度或活性值与设定的浓度或活性值 之间的比例关系的范围。
6. 基质效应:基质指的是样品中被分析物以外的组分。基质常常对分析物的分析过程有显 著的干扰,并影响分析结果的准确性。例如,溶液的离子强度会对分析物活度系数有影响,这些影响和干扰被称为基质效应(matrix effect)。
7. 抗干扰性:
8. 其它:试剂/样本比例、反应时间、价格等。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作流程
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:检测浓度小于1.0pg/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
常见问题
豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 免责声明
1. 试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
2. 严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
FOR RESEARCH USE ONLY.
NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.