鱼类甲状腺素(T4)ELISA试剂盒室温(20-25℃)下保存标本不要超过8小时。2-10℃保存标本,不超过48小时。如耽搁的时间更长,请在-20℃或更低的温度下保存标本。标本避免多次冻融,这样可能会损失蛋白活性,产生错误结果。
产品资料
【名称】:鱼类甲状腺素(T4)elisa试剂盒【规格】:48T/96T
【方法】:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【性状】: 液态
【Elisa试剂盒种属】马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
【标本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
【用途】:科研 实验
【贮存】: 贮存于2℃-8℃.如有需要,我们将竭城为顾客提供售前,售中,售后的全方位服务!
应用领域
鱼类甲状腺素(T4)ELISA试剂盒试剂的准备之显色
显色是 ELISA 中的一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色情况适当缩短或延长反应时间,及时判断。OPD 底物显色一般在室外温或37℃反应20-30 分钟后即不再加深,再延长反应时间,可使本底值ZG。OPD 底物液受光照会自行变色,显色反应应避光进行,显色反应结束时加入终止液终止反应。OPD 产物用硫酸终止后,显色由橙黄色转向棕黄色。TMB 受光照的影响不大,可在室温中置于操作台上,边反应观察结果。但为保证实验结果的稳定性,宜在规定的适当时间阅读结果。T MB 经HRP 作用后,约40 分钟显色达顶峰,随即逐渐减弱,至2 小时后即可完全消退至无色。TMB 的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶YZ剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24 小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。
常见问题
鱼类甲状腺素(T4)ELISA试剂盒实验操作的常见问题:
1. 问--客户用48T试剂盒,大概只有十个样所以他一次用不完那么多板条,但是他想做两次,可封板膜只有一张,那如果用完了怎么办?可以用什么别的东西取代吗?
答--可以把封板膜剪掉,用多少剪多少也可以用封口膜替代。
2. 问--实验过程中温育是放在哪温育呢?
答--可以在水浴箱、细胞培养箱和烘干箱里面都行,只要恒定温度为37度。
标本要求
鱼类甲状腺素(T4)ELISA试剂盒标本收集
1. 本试剂盒可使用血清、血浆、细胞培养上清液、组织液标本。
2. 室温(20-25℃)下保存标本不要超过8小时。2-10℃保存标本,不超过48小时。如耽搁的时间更长,请在-20℃或更低的温度下保存标本。标本避免多次冻融,这样可能会损失蛋白活性,产生错误结果。
准备工作
1. 浓缩洗涤液(20X)用双蒸水稀释成1X(至 500ml)。
操作流程
【鱼类甲状腺素(T4)ELISA试剂盒】操作步骤
(1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
(2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
(3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
(4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
(5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
(6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
(7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
(8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
(9)在450nm波长处测定各孔的OD值。
产品优势
【鱼类甲状腺素(T4)ELISA试剂盒】性能
1. 灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。