人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒采用双抗体夹心ELISA法,具有高效、灵敏、特异的抗体,稳定的重复性和可靠性等优点,欢迎咨询。
参数规格
“人水通道蛋白1(AQP-1)elisa试剂盒”详细参数
【检测方法】:酶联免疫法/酶免法(ELISA)
【产品性状】:96T/48T,盒装液体(两种统一规格)
【贮藏条件】:2-8°C
【产品有效期】:二年,我公司Elisa试剂盒均为批次,可放心购买。
【产品主要成分】:酶标板,试剂,标准品等。
【种属】马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
【产品单价】(具体折扣来电咨询),可免费代测,含税含运费。
【标本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
注:标本必须为液体,不含沉淀。
产品资料
一、Elisa试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(480ng/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
工作原理
二、Elisa试剂盒实验原理
ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的GX催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
操作流程
三、“人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒”技术流程
双抗体夹心法(检测未知抗原)
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
常见问题
四、“人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒”常见问题
实验中Z可能出现问题
一、所有孔未显色?
分析原因:
1、微孔加入抗体后,洗板不彻底,微孔中存在游离的抗体。
2、用错试剂。
3、在操作中忘记加酶或抗体。
解决办法:
1、检查洗板器械,比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加样前,要看清瓶签。
3、严格按说明书操作步骤进行实验,确保每步都到位。
二、所有孔显色偏低?
分析原因:
1、微孔加入抗体后,洗板不彻底,微孔中存在游离的抗体。
2、洗板不干净。
3、抗体污染了酶结合物等其它试剂。
4、温度没达到要求。
5、每孔加入的试剂量低于说明书要求量。
解决办法:
1、手工加蒸馏水洗板时,要避免吸头接触微孔,常更换新的蒸馏水。
2、洗板时要确保每孔都注满蒸馏水(约400ul),且至少洗板五次。
3、严格按说明书要求操作,每次取样要更换吸头。
4、控制孵育温度在25℃。
5、加样器吸头安放牢固避免吸样不足,加样时务必将吸头内液体打尽。
使用方法
五、人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒的回收率
elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,损失越少,回收率越高,如果作标液1PPM,就是1毫克/升,而作出标准数据为0.99毫克/升,就是说你的回收率是99%,这个与真实成分有密切的关系,说明方法的准确度。比如水中总无机氯含量测定,样品水中含有无机氯20mg/L,取100mL被测水样品,加入0.1mL浓度为10mg/mL的含无机氯标准样品,测定时忽略体积变化,如果测定出样品中无机氯为2.98mg/L,则认为回收率为98%。
对于定量检测来说,主要还是一个准确度的验证。不过我看到别人写的内容比我自己想说的要好,所以就贴上去了。相对回收率可能会高于的,如果只是说“损失程度”,其实是不准确的。应该说,回收率越接近,说明这个试剂盒的准确度越高。
常用型号
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