LBP价格,大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒

ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。

二．实验材料与试剂配制

1.仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。

2. 洗液的配制：按1:30的比例配制洗液备用。

标本要求

三．大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存

1）.细胞培养上清：

适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。

2）细胞：

用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104-106/ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。

3）血清：

在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。

4）血浆：

应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。

5）体液：

包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。

6.）组织标本：

切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000 rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。

样品中不能含有NaN3，因NaN3 YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

7）保存：

如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作流程

四．大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒操作步骤

1）取出试剂盒，室温（20-25℃）放置30分钟。

2）分组：取出96孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6个浓度）、空白孔、待测样品组。

3）标准品的稀释：准备小试管6 只，依次编好号码，先在各小试管中加入标准品稀释液100ul，然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中，充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第三只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul 加入第四只试管中，充分混匀；再在该试管中取100ul加入第五只试管中，充分混匀；然后在该试管中取100ul，弃掉。第六只试管作为0 号标准品。

注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。

4）加样：依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入50ul的蒸馏水；其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

5）温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

6）洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒弃去，如此重复5 次，拍干。

7）加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液（空白对照孔除外）。

8）温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。

9）洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置15-30s，充分清洗酶标板5次，用吸水纸彻底拍干。

10）显色：各孔加入显色剂A液50ul后，再加入显色剂B液50ul。

11）终止：25-37℃下避光反应10-15分钟，加入50ul终止液。

12）读板：在450nm波长读取各孔的OD值。

注：读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹，读板时间控制在终止反应后的30分钟内，以免影响准确性。

五．数据计算

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，即为样品的实际浓度。

注意事项

六．【大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒】操作注意事项

(1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

(2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

(3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

(4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

(5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

(6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

(7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

(8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

(9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

1.试剂盒保存：2-8℃

2.有效期：6个月

订购流程

八．大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA试剂盒订货说明

1）卖方确保所订产品与目录技术指标保持一致；

2）为了确保买方产品在运输中的质量，对有特殊要求的低温产品予以湿冰运输。

3）收到货物后如出现质量问题，买方需在收到货物一个月内向卖方提出书面异议。买方逾期不提出异议，视为货物符合其要求，卖方不付任何责任。

4）出现质量以外的问题，如破损等，买方应在收货后一个周内提出。买方未按时提出异议，视为该产品合格。

本公司对所有售出的产品保证质量，并提供良好的售后服务，有关产品质量的投诉，请在收到货物的32天内以书面形式提出，并向我公司技术人员提供相应的材料，我们会及时派人解决。所有形式的赔偿或退换于产品本身，不涉及其他间接内容。凡购买本公司任意款elisa试剂盒，均可享受免费代测服务，并提供技术指导。