人高速泳动蛋白17(HMG-17)ELISA试剂盒提供免费代测的服务。(你只需把标本寄过来,我们为你节省时间,帮你出结果,原始数据,分析数据均可提供,一般时间是5天左右).
参数规格
一、参数规格
产品名称:人高速泳动蛋白17(HMG-17)elisa试剂盒
产品规格:48T 96T
产品产地: 美国
品Pai商标: RD/TSZ
价 格:(具体优惠价格请咨询业务员)
供货数量: 150
Z小起订: 1盒
应用范围: 科研检测
详细资料: 实验方法技术资料
工作原理
二、工作原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗体的微孔中依次加入标本或者标准品、生物素化的抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物显色。底物在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品浓度呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定OD值,计算样品浓度。
产品选型
三、Elisa试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品(480ng/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
性能特点
四、“人高速泳动蛋白17(HMG-17)ELISA试剂盒”特点概述
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置
8.价格优惠,质量保证,限度的节省实验经费。
操作流程
五、ELISA检测操作流程(具体请参照说明书)
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
240ng/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
120ng/L 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
60ng/L 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
30ng/L 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
15ng/L 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。
注意事项
六、“人高速泳动蛋白17(HMG-17)ELISA试剂盒”注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间Z好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,Z好做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
7. 底物请避光保存。
8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
常见问题
七、“人高速泳动蛋白17(HMG-17)ELISA试剂盒”常见问题
实验中Z可能出现问题
一、所有孔未显色?
分析原因:
1、微孔加入抗体后,洗板不彻底,微孔中存在游离的抗体。
2、用错试剂。
3、在操作中忘记加酶或抗体。
解决办法:
1、检查洗板器械,比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加样前,要看清瓶签。
3、严格按说明书操作步骤进行实验,确保每步都到位。
二、所有孔显色偏低?
分析原因:
1、微孔加入抗体后,洗板不彻底,微孔中存在游离的抗体。
2、洗板不干净。
3、抗体污染了酶结合物等其它试剂。
4、温度没达到要求。
5、每孔加入的试剂量低于说明书要求量。
解决办法:
1、手工加蒸馏水洗板时,要避免吸头接触微孔,常更换新的蒸馏水。
2、洗板时要确保每孔都注满蒸馏水(约400ul),且至少洗板五次。
3、严格按说明书要求操作,每次取样要更换吸头。
4、控制孵育温度在25℃。
5、加样器吸头安放牢固避免吸样不足,加样时务必将吸头内液体打尽。